SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4051—2014 出口保健食品中奥利斯他的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of orlistat in health foods for export-HPLC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4051—2014 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国湖南出人境检验检疫局、湖南省检验检疫科学技术研究院、湖南 师范大学。 本标准主要起草人：王美玲、颜鸿飞、付善良、张莹、张帆、李拥军、陈波。 行业标准信息服务平台 SN/T4051—2014 出口保健食品中奥利斯他的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了保健食品中奥利斯他的液相色谱-质谱/质谱测定方法 本标准适用于减肥胶囊、减肥咀嚼片、减肥咖啡、减肥口服溶液、减肥饼干、减肥茶中奥利斯他含量 的测定和确证。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样中的奥利斯他用甲醇超声提取，提取液经稀释、过滤后，用液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法 定量。 4试剂和材料 除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.1 甲醇：液相色谱级。 4.2 乙睛：液相色谱级。 4.3 乙酸铵。 4.45mmol/L乙酸铵溶液：称取0.385g乙酸铵，用水溶解并稀释定容至1000mL。 4.5 甲醇-水混合溶液（1十1，体积比）：量取100ml甲醇，加人100mL水，混匀备用。 4.6 奥利斯他标准品（CAS号：96829-58-2，分子式：C2HNO，）：纯度≥99%。 4.7 奥利斯他标准储备液：准确称取适量的奥利斯他标准品（4.6）用甲醇溶解配制成浓度为1.0mg/mL 的标准储备溶液，4℃下避光保存 4.8奥利斯他标准工作溶液：准确移取一定体积的奥利斯他标准储备溶液（4.7），用甲醇-水混合溶液 （4.5）稀释成0.2ng/mL.0.5ng/ml、1.0ng/mL、5.0ng/mL、10ng/ml.50ng/ml、100ng/mL不同浓 度系列的标准工作溶液，使用前配制。 5仪器和设备 5.1高效液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。 5.2超声波清洗器。 5.3捣碎机。 1 SN/T4051—2014 5.4分析天平：感量为0.0001g和0.01g。 5.5 5离心机：大于等于6000r/min。 6试样制备与保存 6.1试样制备 6.1.1固体试样 片剂、咖啡、茶和饼干研细，混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内；胶囊连同胶囊壳一起捣碎，混 匀，均分成两份，分别装人洁净容器内。 6.1.2液体试样 口服液样品直接混勾，均分成两份，分别装入洁净容器内。密封作为试样，标明标记。 6.2试样的保存 将试样于0℃4℃下保存。在取样、制样过程中，应防止样品受到污染或发生目标物含量的 变化。 7测定步骤 7.1提取 7.1.1片剂、胶囊、饼干、咖啡、茶叶样品 称取1g（精确至0.01g)试样于50mL具塞锥形瓶中，加入30mL甲醇超声提取30min。取出冷 却至室温，将样品全部转移至50mL容量瓶中，用15mL甲醇分数次清洗锥形瓶，合并清洗液至容量瓶 中并用甲醇定容至刻度，摇匀后，静置2min。移取5mL提取液至15m离心管中，在6000r/min离心 5min后，取0.5mL上清液，加入0.5mL甲醇-水混合溶液（4.5），混勾后过0.45μm有机微孔滤膜，供 液相色谱-质谱/质谱仪检测。 7.1.2口服液 准确移取1.0mL试样于10mL容量瓶中，用甲醇水混合溶液（4.5)稀释并定容至刻度，混匀后，过 息服务平台 0.45μm有机微孔滤膜，供液相色谱-质谱/质谱仪检测。 7.2测定 7.2.1液相色谱条件 液相色谱条件如下： 色谱柱：Cs柱，150mm×2.1mm（内径），粒径5μm或相当者； b) 流动相：乙睛-5mmol/L乙酸铵溶液，梯度洗脱程序见表1； c) 流速：0.3mL/min； d) 柱温：40℃； e) 进样量：10μL。 2