SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4048—2014 出口食品中季铵盐的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of quaternary ammonium compounds in food for export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4048—2014 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国吉林出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：李玲、康明芹、张勋、吴连鹏、胡婷婷、吴剑、牟峻、陈明岩、陈冬东。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4048—2014 出口食品中季铵盐的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了出口食品中5种季铵盐的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于猪肉、牛肝、苹果、菠菜、大米、白糖、生乳中十二烷基三甲基溴化铵（DTAB）、十二烷 基二甲基苄基氯化铵（C12-BAC)、十四烷基二甲基苄基氯化铵（C14-BAC)、十六烷基二甲基苄基氯化 铵(C16-BAC)、二癸基二甲基氯化铵(DDAC)的测定和确证。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法 3 方法提要 试样用甲醇或甲醇溶液提取，经固相萃取柱净化，用液相色谱-质谱/质谱测定和确证，外标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇。 4.2甲酸。 4.3乙腈。 4.4 甲酸铵：优级纯。 4.5 氨水（含量为25%，体积分数）：优级纯。 4.6标准物质：十二烷基三甲基溴化铵（dodecyltrimethylammoniumbromide，CAS号：1119-94-4， CisH:,BrN）、十二烷基二甲基苄基氯化铵（dodecyldimethylbenzylammoniumchloride，CAS号：139- o7-1,Cz,Hs：NCI)、十四烷基二甲基苄基氯化铵（tetradecyldimethylbenzylammoniumchloride，CAS 号：139-08-2，C2:H42CIN）、十六烷基二甲基苄基氯化铵（hexadecyldimethylbenzylammonium chloride,CAS号：122-18-9,C2,Ha,CIN)、二癸基二甲基氯化铵（didoctyl dimethyl ammonium chloride， CAS号：7173-51-5,C22H4CIN)，纯度均≥98%。 4.75%氨水溶液（体积分数）：取5.0mL氨水（4.5），用水稀释并定容至100mL。 4.890%甲醇溶液（体积分数）：取900mL甲醇，用水稀释并定容至1L。 4.980%甲醇溶液（体积分数）：取800mL甲醇，用水稀释并定容至1L。 4.102%甲酸甲醇溶液：取20mL甲酸，用甲醇稀释并定容至1L 4.1150mmol/L甲酸铵（含0.1%甲酸溶液）：准确称取3.153g甲酸铵（4.4），并准确吸取1mL甲酸 （4.2），用水稀释并定容至1L。 1 SN/T4048—2014 4.12乙腈-50mmol/L甲酸铵（45+55，体积比）：准确量取45mL乙腈和55mL50mmol/L甲酸铵 （4.11），混匀，用作定容液。 4.13标准储备溶液：分别准确称取各标准物质（4.6)适量（精确至0.0001g）于100mL容量瓶中，用甲 醇稀释至刻度，分别配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液0℃~4℃保存。 4.14标准工作液：从标准储备溶液（4.13）中准确吸取1.0mL于100mL容量瓶中，用甲醇稀释成 10.0μg/mL的溶液。使用时再根据需要用空白基质液（4.15）稀释配制适当浓度的标准工作溶液，现用 现配。 4.15空白基质液：选择不含季铵盐且与待测试样同种类的试样作为空白试样，按照测定步骤7.1和 7.2进行得到空白基质液。 4.16固相萃取柱（SPE）：WCX，3mL,60mg或相当者。使用前依次用3mL甲醇、6mL水预处理。 4.17微孔滤膜：有机系，0.22μm。 5仪器与设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。 5.2超声波发生器。 5.3天平：感量0.0001g和0.01g。 5.4高速匀浆机。 5.57 高速冷冻离心机。 5.6涡旋混合器。 6试样制备与保存 6.1蔬菜水果、粮谷、肉及动物内脏 取具代表性的试样约500g，将其可食用部分切碎后（不可用水洗），用高速匀浆机将样品加工成浆 状，混匀，装人洁净的盛样容器内，密封并标明标记 6.2生乳、糖 取具代表性的试样500g，混匀，装人洁净的盛样容器内，密封并标明标记。 6.3试样保存 肉类及动物内脏试样于-18℃以下冷冻保存，其他试样于0℃～4℃下保存。 在制样的操作过程中，应防止试样受到污染或发生残留物含量的变化 7测定步骤 7.1提取 7.1.1蔬菜水果、粮谷、糖、肉及动物内脏 称取2g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入10mL90%甲醇溶液（4.8），涡旋混合2min， 超声10min后，以10000r/min（一4℃）冷冻离心5min，取上清液于另一50mL离心管中。残渣用 10mL80%甲醇溶液（4.9）重复提取一次，合并上清液并混匀，待净化