SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3925—2014 出口动物源食品中多种米尔贝霉素残留量 的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of milbemycins residues in foodstuffs of animal origin for export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2014-04-09发布 2014-11-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3925—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本标准的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任， 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：康海宁、岳振峰、李勇、叶刚、谢丽琪、林黎、侯乐锡、沈金灿、华红慧。 行业标准信息服务平台 SN/T3925—2014 出口动物源食品中多种米尔贝霉素残留量 的测定液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了动物源食品中莫西丁克、米尔贝霉素A：、米尔贝霉素A4、米尔贝霉素D、奈马克丁残 留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于鸡肉、猪肉、牛肉、鸡肝、猪肝、牛肝、鸡肾、猪肾、牛肾、鸡蛋、牛奶、鱼肉中莫西丁克、米 尔贝霉素A3、米尔贝霉素A4、米尔贝霉素D、奈马克丁残留量的测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 采用叔丁基甲醚提取试样中（牛奶除外）残留的米尔贝霉素类药物，提取液吹氮浓缩重新溶解后，经 硅胶柱净化，浓缩，液相色谱-质谱/质谱检测和确证，外标法定量。 牛奶中的米尔贝霉素类药物残留采用乙睛提取，提取液经C18柱净化浓缩，液相色谱-质谱/质谱检 测和确证，外标法定量。 4试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水采用GB/T6682规定的一级水。 4.1叔丁基甲醚。 4.2 乙酸乙酯。 4.3 正已烷。 4.4乙腈：高效液相色谱纯。 4.5 甲醇：高效液相色谱纯。 4.6 二氯甲烷。 4.7 甲酸：高效液相色谱纯。 4.8无水硫酸钠：650℃灼烧4h，冷却后，置于干燥器中备用。 4.9氯化钠。 （4.6），混合均匀。 4.11淋洗液：乙酸乙酯+正已烷（6+94，体积比），准确量取60mL乙酸乙酯（4.2）和940mL正已烷， 混合均匀。 1 SN/T 3925—2014 4.12洗脱液：乙酸乙酯+正已烷（4+6，体积比），准确量取400mL乙酸乙酯和600mL正已烷，混合 均匀。 4.13定容液：乙腈+水（1+1，体积比），准确量取50mL乙腈（4.4）和50mL水，混合均匀。 4.14乙睛水溶液：乙睛十水（3+7，体积比），准确量取300mL乙睛和700mL水，混合均匀。 4.150.1%甲酸水溶液：准确量取1.0mL甲酸（4.7)至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度线。 mycinA3，CAS编号51596-10-2），纯度98%，浓度为10ng/μL：米尔贝霉素A,（milbemycinA4，CAS 编号51596-11-3），纯度99.1%，浓度为10ng/μL米尔贝霉素D（milbemcyinD，CAS编号77855-81-3）， 纯度95.0%；奈马克丁（nemadectin，CAS编号102130-84-7），纯度95.0%。 4.17标准储备液的配制：分别准确称取一定量的莫西丁克、米尔贝霉素D、奈马克丁标准物质，用甲醇 （4.5）溶解后配制成浓度为500、95.0、95.0mg/L的标准储备溶液，一18℃以下避光保存，可使用 12个月。 4.18混合标准工作溶液的配制：准确移取一定体积的标准储备液，用甲醇稀释成浓度为1.0mg/L的 混合标准工作液。一18℃以下避光保存，可使用3个月。 4.19硅胶固相萃取柱：500mg，6mL。硅胶柱使用前先加入约0.5cm高度的无水硫酸钠（4.8），用 6mL正已烷活化，保持柱体湿润。 4.20Cis固相萃取柱：500mg，6mL，或相当者。使用前用5mL甲醇、5mL水活化，保持柱体湿润。 4.21 微孔滤膜：0.22μm，有机相型。 5仪器和设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI)。 5.2固相萃取装置。 5.3水平往复式振荡器。 5.4旋涡混匀器。 5.5 吹氮浓缩仪。 5.6真空泵。 5.7聚丙烯离心管：50mL,15mL，具塞，带刻度。 5.9均质器。 6试样制备与保存 6.1动物肌肉及内脏、鸡蛋、鱼肉 从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约500g，充分搅碎混匀，试样装入洁净容器中，密 封，并标明标记，于一18℃以下冷冻存放。 6.2牛奶 从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，装入洁净容器中，密封，并标明标记，于4℃冷藏 存放。 在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 2