SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3847—2014 出口食品中苯二氮卓类药物的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of benzodiazepines content in foods for export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2014-01-13发布 2014-08-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3847—2014 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任， 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国重庆出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫 局、重庆市进出口食品安全工程技术研究中心。 本标准主要起草人：李贤良、存显、曹淑瑞、邓晓军、郑国灿、张雷、王国民。 行业标准信息服务平台 I SN/T3847—2014 出口食品中苯二氮卓类药物的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了保健食品中普拉西洋、去甲西泮、氯氮卓等22种苯二氮卓类药物（见附录A）的液相 色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于保健食品（片剂、冲剂、胶囊、糖浆、口服液）中普拉西泮、去甲西泮、氯氮卓等22种苯 二氮卓类药物的测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样中的苯二氮卓类药物用二氯甲烷-乙醚混合溶液提取，提取液经浓缩后，用液相色谱-串联质谱 仪测定，内标法定量。 4试剂和材料 除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇：高效液相色谱级。 标准信息服 4.2 乙睛：高效液相色谱级。 4.3 二氯甲烷：高效液相色谱级。 4.4 乙醚：高效液相色谱级。 4.5 乙酸铵。 4.6 氢氧化钠。 4.7 硼砂(NazB,O,·10H,O)。 4.8 2mol/L氢氧化钠溶液：称取8g氢氧化钠（4.6）溶于90mL水中，冷却至室温，用水定容至 100 mL. 4.9硼砂-氢氧化钠缓冲液：称取7.6g硼砂（4.7）溶解于900mL水中，用氢氧化钠溶液（4.8）调节pH 值到11.0士0.1，用水稀释到1L。 4.10 二氯甲烷-乙醚溶液（20+80，体积比）：量取200mL二氯甲烷（4.3）和800mL乙醚（4.4），混勺。 4.11 乙睛溶液（20+80，体积比）：量取20mL乙睛（4.2）和80mL水，混匀，现配现用。 4.12苯二氮卓类药物及同位素内标标准物质：标准物质信息见附录A。标准物质均为1.0mg/mL的 甲醇溶液，同位素内标标准物质为100.0ug/mL甲醇溶液。 1 SN/T3847—2014 4.14同位素内标标准中间液：用乙腈分别稀释同位素内标标准溶液至浓度为100.0ng/mL，于0℃~ 4℃保存。 4.15标准工作液：根据需要，临用时吸取一定量的标准中间溶液（4.13）和同位素内标标准中间溶液 （4.14），混匀。用乙睛溶液（4.11）稀释配制成适当浓度的混合标准工作溶液（参考线性浓度范围为 1.0ng/mL～50.0ng/mL），每毫升混合标准工作溶液含有同位素内标各20.0ng。现配现用。 4.160.22μm微孔滤膜：有机系。 5仪器和设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI)。 5.2 电子天平：感量为0.01g和0.1mg。 5.3 超声波清洗器。 5.4万 旋涡混匀器。 5.5 氮吹仪。 5.6 高速离心机：转速不低于6500r/min。 5.7 具塞塑料离心管：50mL。 6试样的制备与保存 6.1片剂：取有代表性样品约100g，用碾钵碾碎，装人洁净容器作为试样，密封并做好标识，于常温保存。 6.2胶囊：取有代表性样品约100g，胶囊中药物用碾钵碾碎，胶囊壳用剪刀剪碎，然后将二者混匀，装 入洁净容器作为试样，密封并做好标识，于常温保存。 6.3液体样品：取有代表性样品100g，搅拌均匀后装入洁净容器内，密封并做好标识，于0℃～4℃ 保存。 7测定步骤 7.1提取 准确称取2.0g试样（精确到0.01g）于50mL具塞离心管中，加人10mL硼砂-氢氧化钠缓冲液 （4.9），用氢氧化钠溶液（4.8）调节pH至11.0左右。依次加入200uL同位素内标中间液（4.14）和 层有机相于100mL旋蒸瓶中，再用20mL二氯甲烷-乙醚溶液（4.10）重复提取两次，合并提取液，于 40℃下氮气浓缩吹干。用1.0mL乙溶液（4.11）振荡溶解残渣，过0.22μm滤膜（4.16）后，供液相色 总服务平台 谱-质谱/质谱仪测定。 7.2测定 7.2.1 液相色谱参考条件 液相色谱参考条件如下： a) 色谱柱：C18，150mm×2.0mm（内径），5.0μm，或相当者 b) 流动相：A：乙睛；B：2mmol/L乙酸铵溶液（含0.2%甲酸），梯度洗脱程序见表1 c) 流速：0.30mL/min； d）柱温：40℃； e）装 进样量：30μL。 2