SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3863—2014 出口食品中水溶性碱性着色剂的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of water soluble basic dyes in foods for export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2014-01-13 发布 2014-08-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3863—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共 和国北京出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：伊雄海、邓晓军、彭涛、李小林。 行业标准信息服务平台 SN/T3863—2014 出口食品中水溶性碱性看色剂的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了出口食品中碱性橙Ⅱ、碱性嫩黄O、碱性品红、碱性紫5BN、罗丹明B的测定方法。 本标准适用于硬糖、龙虾片、糖浆、果酱、饼干、蜜饯、酸奶、午餐肉、果汁中5种水溶性碱性着色剂的 液相色谱-质谱/质谱测定和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样中水溶性碱性着色剂用水和正己烷饱和的乙睛溶液提取，采用C18反相填料基质分散固相萃 取法净化，反相色谱柱分离，液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。 4试剂材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1乙腈：色谱纯。 4.2正已烷：色谱纯。 4.3柠檬酸钠。 4.4柠檬酸氢二钠。 4.5 氯化钠。 4.6无水硫酸镁：550℃灼烧4h，贮于干燥器中备用。 4.7 Cis粉末：粒径40μm~63um，平均孔径60A，含碳量17%。 4.8甲酸：纯度≥99%。 4.95%（体积分数）甲酸-乙睛溶液：量取5mL甲酸溶解于95mL乙睛中。 4.10含20mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸水溶液：精确称取1.26g甲酸铵和1mL甲酸溶解于纯水中并 定容至1L。 4.11萃取包：含4g无水硫酸镁、1g氯化钠、1g柠檬酸钠、0.5g柠檬酸氢二钠。 4.12净化包：含150mgC1s粉末，900mg无水硫酸镁。 4.13标准物质：水溶性碱性着色剂标准物质，纯度≥98.0%。详细标准物质信息见附录A中表A.1。 备溶液。该溶液配制于棕色容量瓶中，一18℃以下避光保存，有效期1个月。 1 SN/T 3863—2014 量瓶中，4℃以下避光保存，有效期1个月 4.16基质标准工作溶液的配制：根据需要，临用时吸取一定量的标准中间溶液，用基质空白溶液配制 成适当浓度的混合标准工作溶液。低于4℃避光冷藏保存，现用现配。 51 仪器与设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2电子天平：感量分别为0.01g，0.0001g。 5.3均质器。 5.4J 陶瓷均质子。 5.5 离心机：低速离心机转速不低于4500r/min，高速离心机，转速不低于15000r/min。 5.6离心管：15mL,50mL。 5.7涡漩混匀器。 5.8氮吹仪。 6i 试样制备与保存 6.1硬糖、龙虾片、饼干、蜜饯、午餐肉 从所取全部试样中取出有代表性试样可食部分约500g，低温冷冻后充分捣碎均匀，装入洁净容器 中，密封，并标明标记，于一18℃以下冷冻存放。 6.2糖浆、果酱 从所取全部试样中取出有代表性试样约500g，搅拌均匀后装入洁净容器中，密封，并标明标记，于 一18℃以下冷冻存放。 6.3果汁、酸奶 取代表性试样约500mL，装人洁净容器中，含二氧化碳试样加热驱除二氧化碳，密封，并标明标记， 信息服务平 于一18℃以下冷冻存放。 7分析步骤 7.1水溶性碱性色素分析 7.1.1提取 称取试样5g（精确到0.01g）于50mL离心管中，加人5mL水，于60℃水浴超声15min，放人陶 瓷均质子（5.4），加人10mL正已烷饱和的乙睛，剧烈振荡2min，并超声提取15min，快速加人萃取包 （4.11），剧烈振荡1min，静置5min，再次剧烈振荡1min，于4000r/min下离心10min，转移6mL上 层乙睛溶液于15mL塑料离心管中。 7.1.2净化 于上述提取液中，加人净化包（4.12），振荡2min。于4000r/min下离心5min，转移4ml上清液 于另一15mL塑料离心管中，加人40μL含5%甲酸-乙睛溶液（4.9），旋涡振荡。取0.5mL乙腈提取液 2