SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3853—2014 出口食品中曲酸的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of kojic acid in foods for export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2014-01-13 发布 2014-08-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3853—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：黄娟、柳菌、刘艳、费晓庆、陈雷、杨雯荃、赵增运、沈崇钰。 行业标准信息服务平台 SN/T 3853—2014 出口食品中曲酸的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了出口食品中曲酸的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于出口水果、蔬菜、鱼、虾、肉罐头、糕点、饮料、糖浆、葡萄酒以及酱菜、豆面酱、酱油、食 醋中曲酸的液相色谱-质谱/质谱测定和确证。 2规范性文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 固体样品用乙睛提取，液体样品用水稀释并加乙酸锌和亚铁氰化钾沉淀后用液相色谱-质谱/质谱 法测定，内标法定量。 试剂和材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂，水采用GB/T6682中规定的一级水。 4.1 甲酸：高效液相色谱级。 4.2正已烷。 4.3甲醇：高效液相色谱级。 4.4乙睛：高效液相色谱级。 4.5乙酸铵：高效液相色谱级。 4.6乙酸锌:Zn(CH,COO)2·(H,O)2。 4.7亚铁氰化钾：K,Fe(CN)。·（H,O)3。 台 4.8无水硫酸钠：NazSO。 瓶中，加0.3mL甲酸（4.1），用水定容至刻度。 4.11乙酸锌溶液（20%）：准确称取23.93g乙酸锌（4.6），用水溶解并转移至100mL容量瓶中，用水定 容至刻度。 4.12亚铁氰化钾溶液（10%）：准确称取11.47g亚铁氰化钾（4.7），用水溶解并转移至100mL容量瓶 中，用水定容至刻度。 4.13乙睛饱和的正已烷溶液：100mL乙睛（4.4）中加人100mL正已烷（4.2），充分振荡后，静置分层， 取上层液体。 1 SN/T 3853—2014 4.14曲酸标准品：KojicacidC,HO4，CAS号：501-30-4，纯度大于等于98%。 4.15曲酸同位素内标：U-［13C]-Kojicacid,浓度为25μg/mL的乙睛溶液。 4.16曲酸标准储备液：准确称取适量的曲酸标准品（4.14），用甲醇（4.3）配制成浓度为1mg/mL的标 准储备溶液。0℃～4℃保存。 4.17曲酸标准中间溶液：准确移取一定体积的标准储备液（4.16），用水稀释为1.0ug/mL，0℃～4℃ 保存。 4.18曲酸内标工作液：准确移取一定体积的内标储备液（4.15），用乙睛（4.4）稀释成1.0μg/mL， 0℃~4℃保存。 4.19微孔滤膜：水相，0.45μm。 51 仪器和设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2 分析天平：感量分别为0.01g和0.01mg。 5.3 超声波振荡器。 5.4高速离心机：12000r/min。 5.5涡旋混合器。 5.6氮吹仪。 5.7具塞塑料离心管：50mL。 5.8容量瓶：25mL。 5.9组织捣碎机。 6试样制备和保存 6.1鱼、虾、肉罐头、糕点、酱菜：取代表性样品约500g，用组织捣碎机捣碎，混匀，均分成两份作为试 样，分别装入洁净容器，密封并做好标记，于一18℃冰箱内保存。 6.2水果、蔬菜：取代表性样品约500g，将其可食用部分切碎后，用组织捣碎机将样品加工成浆状，混 匀，均分成两份作为试样，分别装人洁净容器，密封并做好标记，于0℃～4℃冰箱内保存。 6.3酱及酱油、醋、酒、饮料、糖浆：取代表性样品约500g，在混样器中充分混匀，均分成两份作为试样， 分别装入洁净容器，密封并做好标记，于0℃～4℃冰箱内保存。 6.4在制样和保存的操作过程中，应防止样品受到污染或发生分析物含量的变化 7分析步骤 7.1样品处理 7.1.1鱼、虾、肉罐头、酱菜、水果、蔬菜、糕点等 称取2g试样（精确到0.01g）置于50mL具塞塑料离心管中，加入200μL内标工作液（4.18），加入 乙睛（4.4）10mL，超声振荡15min后，加人2g左右无水硫酸钠（4.9），8000r/min高速离心5min。取 上层清液收集于10mL试管中，于氮吹仪中45℃吹干，用1mL水定容[对鱼、虾等脂肪含量较高的样 品，还需加人0.5mL饱和正已烷溶液（4.13）脱脂，于12000r/min下离心3min后，水层过0.45μm 水相滤膜（4.19），供液相色谱-质谱/质谱仪测定。 2