SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3630—2013 果蔬中溶组织内阿米巴包囊检测方法 巢式PCR-RFLP法 Detection of Entamoeba histolytica cysts in vegetables and fruitsNestedPCR-RFLPmethod 行业标准信息服务平台 2013-08-30发布 2014-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 行业标准 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 果蔬中溶组织内阿米巴包囊检测方法 服务平台 巢式PCR-RFLP法 SN/T3630—2013 * 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013） 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010）64275323 网址www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 开本880×12301/16 印张0.75 ：字数18千字 2014年2月第一版 2014年2月第一次印刷 印数1—1600 * 书号：155066·2-26516 定价16.00元 SN/T3630—2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局、天津生物芯片技术有限责任公司。 本标准主要起草人：王乃福、吴冬雪、张海英、高旗利、曹勃阳。 行业标准信息服务平台 SN/T3630—2013 果蔬中溶组织内阿米巴包囊检测方法 巢式PCR-RFLP法 1范围 本标准规定了果蔬中溶组织内阿米巴包囊的巢式PCR-RFLP检测方法。 本标准适用于果蔬中溶组织内阿米巴包囊的快速检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析试验室用水规格和实验方法 SN/T1193基因检验实验室技术要求 3术语和定义、缩略语 3.1术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1. 1 溶组织内阿米巴EntamoebahistolyticaSchaudinn 溶组织内阿米巴即疾阿米巴，属内阿米巴科的内阿米巴属，为侵袭型阿米巴病的病原虫，主要寄 生于结肠，引起侵袭性肠道和肠道外阿米巴病，为全球分布，多见于热带与亚热带；溶组织内阿米巴主要 感染人类和其他灵长类动物；生活史可分为滋养体、囊前期、包囊和囊后滋养体4期，成熟的4核包囊为 感染期，在传播上起重要作用，仅见于宿主的粪便内。 3. 1. 2 溶组织内阿米巴包囊Entamoebahistolyticacyst 滋养体在肠腔里形成包囊的过程称为成囊（encystation）。滋养体在肠腔以外的脏器或外界不能成 囊。在肠腔内滋养体逐渐缩小，停止活动变成近似球形的包囊前期（precyst），以后变成一核包囊并进 行二分裂增殖。胞质内有一特殊的营养储存结构即拟染色体（chromatoidbody），呈短棒状，对虫株鉴 别有意义。在未成熟包囊中有糖原泡（glycogenvacuole）。成熟包囊有4个核，圆形，直径为1oμm～ 20um不等，包囊壁厚约125nm～150nm；核为泡状核，与滋养体的相似但稍小。 3.2缩略语 下列缩略语适用于本文件。 nestedPCR：巢式聚合酶链反应 RFLP：限制性片段长度多态性 4设备和材料 4.1高速冷冻离心机：最大离心力13000g。 1