SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 36092013 的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of imperatorin and isoimperatorin in cosmetics fo import and export—LC/MS/MS Method 行业标准信息服务平台 2013-08-30发布 2014-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3609—2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草， 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国广东出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：陈捷、徐娟 行业标准信息服务平台 SN/T3609—2013 进出口化妆品中欧前胡素和异欧前胡素 的测定液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准适用于化妆品中欧前胡素和异欧前胡素含量的测定。 欧前胡素和异欧前胡素的测定低限均为0.5mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样中欧前胡素和异欧前胡素采用甲醇提取，一18℃下冷冻净化，上清液稀释后，液相色谱-质谱 质谱测定，外标法定量。 4试剂和材料 除特殊注明外，所有试剂均为色谱纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇。 4.2醋酸氨：分析纯。 4.3欧前胡素和异欧前胡素标准品： 欧前胡素（imperatorin）：CAS号：482-44-0，相对分子质量：270.28，分子式：C16Hi4O4，纯 度：98%。 一异欧前胡素（isoimperatorin）：CAS号：482-45-1，相对分子质量：270.29，分子式：C1HO4，纯 度：98%。 4.4乙酸氨溶液（1mol/L）：称取77.08g乙酸氨，用水定容至1000mL。 4.5 甲醇+10mmol乙酸氨：1L甲醇中加人10mL1mol/L乙酸氨水溶液。 4. 6 乙酸氨溶液（5mmol/L）：称取0.3854g乙酸氨，用水定容至1000mL。 4.7甲醇-水（80+20，体积比）：量取80mL甲醇，加人20mL水，混匀备用。 1000uμg/mL的标准储备液，在一18℃避光存放，保存期1年。 4.9标准中间溶液：分别吸取欧前胡素和异欧前胡素贮备溶液各1.0mL，置于100mL容量瓶中，用 甲醇定容至100mL得到浓度为10.0ug/mL的混合标准中间溶液，在一18℃避光存放，保存期1年。 4.10标准工作液：将标准中间溶液（4.9)用甲醇逐级稀释为标准工作溶液，浓度在0.25ng/mL～ 20ng/mL范围内，现配现用。 1 SN/T3609—2013 5仪器和设备 5.1高效液相色谱-质谱/质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。 5.2分析天平：感量为0.1mg和0.01 mg。 5.3涡旋振荡器。 5.4水浴超声波发生装置。 5.5低温高速离心机（最大转速10000r/min）。 5.6高速离心机（最大转速15000r/min）。 5.7具塞塑料离心管：50mL 6 测定步骤 6.1提取 称取试样1g（精确至0.001g）至50mL离心管中，加10.0mL甲醇（4.1），涡旋振荡2min，45℃ 水浴超声30min，一4℃下，4500r/min离心10min，分离上清液于具塞离心管，待净化。 6.2净化 将上清液置于一18℃下冷冻2h后，在冷冻状态下，快速吸取冷冻清液于具塞试管中，恢复至室温 在12000r/min下，离心5min，上清液过0.2μm滤膜，收集滤液于具塞试管，再吸取滤液100μL，置于 刻度比色管中，用甲醇-水定容到10.0mL，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。 行业标 6.3测定 6.3.1液相色谱条件 液相色谱条件如下： a) 信息服务平台 b) 流动相：乙酸氨甲醇溶液（4.5）-乙酸氨水溶液（4.6）=80十20（体积比）； c) 流速：0.25mL/min； d) 柱温：40℃； e） 进样量：10μL。 6.3.2质谱条件 质谱条件如下： a) 离子源：电喷雾离子源（ESI)； b）扫描方式：正离子扫描； c) 监测模式：多反应监测（MRM)； d) 雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏 度达到检测要求，参考条件参见附录A； e） 喷雾电压、去集簇电压、碰撞能量等参数应优化至最优灵敏度，参考条件参见附录A中 表 A. 1。 2