SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3399—2012 大豆茎溃疡病菌检疫鉴定方法 TaqMan MGB探针实时荧光PCR检测方法 Detection and identification of Diaporthe phaseolorum var. caulivora and Diaporthe phaseolorum var.meridionalis-Real-time fluorescent PCR with TaqMan MGB probe 行业标准信息服务平台 2012-12-12发布 2013-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3399—2012 行业标准信 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 大豆茎溃疡病菌检疫鉴定方法TaqMan MGB探针实时荧光PCR检测方法 SN/T3399—2012 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013） 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010)64275323 网址 www. spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 开本880×12301/16印张0.5字数8千字 2013年7月第一版2013年7月第一次印刷 印数1—1600 * SN/T3399-2012 书号：155066·2-25249定价14.00元 SN/T3399—2012 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：陈枝楠、王颖、程颖慧、胡献星、章桂明。 行业标准信息服务平台 SN/T3399—2012 TaqMan 大豆茎溃疡病菌检疫鉴定方法 MGB探针实时荧光PCR检测方法 1范围 本标准规定了大豆茎溃疡包括大豆北方茎溃疡病菌[Diaporthephaseolorum（CookeetEll.）Sacc. var.caulivoraAthowetCaldwell和大豆南方茎溃疡病菌［Diaporthephaseolorum（CookeetEll.） Sacc,var.meridionalisF.A.FernandezTaqManMGB探针实时荧光PCR检疫鉴定方法。 本标准适用于大豆种子、病残体中大豆茎溃疡病菌的实时荧光PCR检疫鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T1899植物检疫大豆茎溃疡病菌检疫鉴定方法 3原理 3.1基本信息 学名： 大豆北方茎溃疡病菌：Diaporthephaseolorum（CookeetEll.）Sacc.var.caulivoraAthowetCald well 大豆南方茎溃疡病菌：Diaporthephaseolorum（CookeetEll.）Sacc.var.meridionalisF.A.Fer nandez 英文俗名：SoybeanStemCanker 分类地位：大豆茎溃疡病菌属真菌界Fungi、子囊菌门Ascomycota、子囊菌钢Ascomycetes、间座壳 目Diaporthales、黑腐皮壳科Valsaceae、间座壳属DiaportheNits.U 近似种：大豆茎荚枯腐病菌Diaporthephaseolorumvar.sojae和大豆拟茎点种腐病菌Phomopsis longicolla。 3.2鉴定原理 根据大豆南、北方茎溃疡病菌的分子生物学特征及实时荧光PCR原理，应用相关仪器包括实时荧 光PCR仪等对大豆南、北方茎溃疡病菌进行鉴定。 4仪器用具和试剂 4.1仪器用具 烘箱、高压灭菌锅、显微镜、解剖镜、天平（感量1/100；1/10000）、研钵、摇床、水浴锅、制冰机、纯水 仪、旋涡振荡器、台式离心机、核酸蛋白分析仪、高速冷冻离心机、真空抽干仪、冰箱、超净工作台、实时荧 1