SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3306.4—2012 国境口岸环介导恒温扩增（LAMP)检测方法 第4部分：嗜肺军团菌 Loop-mediated isothermal amplification detection method at frontier port- Part 4:Legionella 行业标准信息服务平台 2012-12-12 发布 2013-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3306.4—2012 行业标准信 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 国境口岸环介导恒温扩增（LAMP）检测方法 第4部分：嗜肺军团菌 SN/T 3306.4—2012 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013） 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010)64275323 网址 www. spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 开本880×12301/16 印张0.75字数12千字 2013年6月第一版2013年6月第一次印刷 印数1—1600 * SN/T3306.4-2012 书号：155066·2-25405定价16.00元 SN/T3306.4—2012 前 言 SN/T3306《国境口岸环介导恒温扩增（LAMP）检测方法》共分为4部分： 一 第1部分：鼠疫杆菌； 第2部分：产毒素霍乱弧菌； 一第3部分：志贺氏菌； 第4部分：嗜肺军团菌。 本部分为SN/T3306的第4部分。 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任， 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局、正元盛邦（天津）生物科技有限公司。 本部分主要起草人：左锋、鞠文东、陆哗、柴宏森、刘涛、祁军、谭绪良、张靖 行业标准信息服务平台 SN/T 3306.4—2012 国境口岸环介导恒温扩增（LAMIP检测方法 第4部分：嗜肺军团菌 1范围 SN/T3306的本部分规定了国境口岸检测环境水样品中嗜肺军团菌的环介导恒温核酸扩增 (LAMP)法。 本部分适用于国境口岸嗜肺军团菌的筛选检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 WS/T230—2002临床诊断中聚合酶链反应（PCR)技术的应用 SN/T2528饮用水中军团菌检测 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 Betaine：甜菜碱 Bst酶[BstDNApolymerase（largefragment)］：BstDNA聚合酶（大片段） DNA（deoxyribonucleic acid)：脱氧核糖核酸 dNTP（deoxyribonucleosidetriphosphate）：脱氧核苷三磷酸 EDTA(ethylenediamine tetraacetic acid):乙二胺四乙酸 LAMP(loop-mediatedisothermalamplification）：环介导恒温扩增 TritonX-100：聚乙二醇辛基苯基醚 4 生物安全措施 为了保护实验室人员的安全，保证试验的顺利进行，应由通过生物安全培训并具备资质的工作人员 检测嗜肺军团菌，所有培养物和废弃物应参照GB19489中的有关规定执行。 5防污染措施 防止污染措施应符合WS/T230的规定。 6技术概要 根据嗜肺军团菌的特异性序列基因设计特异性内引物、外引物各一对，或再增加环状引物一对，特 1