SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3328—2012 扇贝物种鉴定方法 SSR 法 Protocol of identification of scallops-Simple-sequence repeats(SSR) 行业标准信息服务平台 2012-12-12 发布 2013-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3328—2012 行业标准信 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 扇贝物种鉴定方法SSR法 SN/T 33282012 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013) 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010)64275323 网址 www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×12301/16 印张0.75字数12千字 2013年6月第一版 2013年6月第一次印刷 印数1—1600 * SN/T3328-2012 书号：155066·2-25385定价16.00元 SN/T3328—2012 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布结构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国烟台出人境检验检疫局、中华人民共和国山东出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：方绍庆、岳志芹、尹伟力、刘宁、张京宣、于红光、王颖、许红岩、钟响、鲁闽、段效辉、 栾晶、栗智平、耿金培。 行业标准信息服务平台 SN/T3328—2012 扇贝物种鉴定方法SSR法 1范围 本标准规定了扇贝物种SSR鉴定方法。 本标准适用于进出境冰鲜、干制、熟制罐头类水产品中对扇贝的种类鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 SN/T1193基因检验实验室技术要求 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 简单序列重复simplesequencerepeatSSR 微卫星microsatellite 侧翼区序列比较保守，核心区以1～6的核苷酸序列成首尾相连的串联重复。微卫星在真核生物基 因组中分布广泛，具有多态性丰富、共显性遗传、结果稳定等优点，目前已在种群遗传分析、亲本鉴定、遗 传连锁图谱构建等方面得到广泛应用。 3.2 聚合酶链式反应polymernasechainreaction；PCR 以耐热DNA聚合酶和一对引物（与待测目标核酸分子序列同源的DNA片段）通过高温（DNA分 子变性）和低温（引物和目标核酸分子复性并被耐热DNA聚合酶延伸）交替循环扩增待测目标核酸分 思服务平 子的方法。 4原理 制备并筛选栉孔扇贝、华贵栉孔扇贝、虾夷扇贝和海湾扇贝小的DNA片段，利用小插入片段文库 筛选微卫星标记，构建小型基因组DNA文库。然后使用含有特定重复序列的寡聚核苷酸序列的序列 设计引物，对四种扇贝进行特异性PCR扩增，对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，对目的物种扩增出 DNA片断判定扇贝种类。扇贝形态特征参见附录A。 5仪器设备和主要试剂 5.1仪器设备 PCR仪、组织研磨器、超净工作台、制冰机、高速冷冻离心机、水浴锅、台式小型离心机、常规冰箱、 1