SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3235—2012 出口动物源食品中多类禁用药物残留量 检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of multi-groups of banned drug residues in foodstuffs of animaloriginforexportLC-MS/MSmethod 行业标准信息服务平台 2012-10-23发布 2013-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3235—2012 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、中华人民共和国上海出人境检验检疫 局、深圳大学。 本标准主要起草人：岳振峰、张毅、赵凤娟、胡晓苑、朱坚、邓晓军、肖陈贵、陈小霞、蓝芳、欧阳娜、 文燕玲、李丽苏。 行业标准信息服务平台 SN/T3235—2012 出口动物源食品中多类禁用药物残留量 检测方法液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了动物源性食品中包括β受体激动剂类、雄性激素类、雌性激素类、糖皮质激素类、硝基 咪唑类、二羟基苯甲酸内酯类、三苯甲烷类、镇静剂类以及氯霉素等九类禁用药物残留量测定的制样、液 相色谱-质谱/质谱筛查和测定。多种禁用兽药标准品信息参见附录A。 本标准适用于牛奶、动物肌肉中西玛特罗、克仑特罗、菲诺特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林、 妥布特罗、去氢睾酮、表睾酮、去氢甲睾酮、诺龙、睾酮、丙酸倍氯米松、倍他米松、曲安西龙、曲安奈德、玉 米赤霉烯酮、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、地美硝唑、异 丙硝唑、甲硝唑、洛硝哒唑、已二烯雌酚、己烯雌酚、已烷雌酚、氯西嗪、地西洋及氯霉素的筛查和测定。 本标准适用于肝脏中西玛特罗、克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林、妥布特罗、去氢睾酮 表睾酮、甲睾酮、诺龙、睾酮、倍他米松、氢化可的松、曲安西龙、曲安奈德、玉米赤霉烯酮、α-玉米赤霉烯 醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、地美硝唑、异丙硝唑、甲硝唑、洛硝哒唑、 已二烯雌酚、己烯雌酚、己烷雌酚、氯丙嗪、地西及氯霉素的筛查和测定。 本标准适用于水产品中西玛特罗、克仑特罗、菲诺特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林、妥布特 罗、去氢睾酮、表睾酮、氟甲睾酮、去氢甲睾酮、甲睾酮、丙酸诺龙、诺龙、丙酸睾酮、睾酮、丙酸倍氯米松、 倍他米松、醋酸可的松、氟氢可的松、氢化可的松、曲安西龙、曲安奈德、玉米赤霉烯酮、α-玉米赤霉烯醇、 3-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、地美硝唑、异丙硝唑、甲硝唑、洛硝哒唑、羟 甲基甲硝咪唑、己二烯雌酚、己烯雌酚、已烧雌酚、氯丙嗪、地西洋、氯霉素、孔雀石绿、隐性孔雀石绿、结 标准信 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3样品制备与保存 3.1动物肝脏、肌肉和水产品 从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约500g，用组织捣碎机充分捣碎均匀，装人洁净容 器中，密封，并标明标记，于一18℃以下冷冻存放。 3.2牛奶 从所取全部样品中取出有代表性样品500mL，充分混匀，装人洁净容器中，密封，并标明标记，于 一18℃以下冷冻存放。 1 SN/T 3235—2012 4方法提要 对于水产品中的禁用药物，分别以氨化乙睛和酸化乙睛提取；对于牛奶、肝脏和肌肉中的禁用药物 用β-葡糖苷醛武酶-芳基硫酸酯酶在乙酸铵缓冲液中酶解后，分别以氨化乙睛和酸化乙腈提取。提取液 以QuEChERS吸附剂净化后，用高效液相色谱-质谱/质谱仪测定，内标法或外标法定量。 5试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯；水为GB/T6682规定的一级水。 5.1乙腈，色谱级。 5.2甲醇，色谱级。 5.3冰乙酸，色谱级。 5.4氨水，色谱级。 5.5乙酸铵，色谱级。 5.6甲酸，色谱纯。 5.8N-丙基乙二胺吸附剂（PSA），40μm～60μm粒径范围，100A平均孔径。 5.9十八烷基键合硅胶吸附剂（Cis-封端），40μum~60μm粒径范围60A平均孔径 5.10 石墨化碳黑吸附剂（GCB)，40μm～60μm粒径范围，60A平均孔径。 5. 11 无水硫酸钠，分析纯，500℃灼烧4h，置于干燥器中备用。 5.12无水硫酸镁，分析纯，500℃灼烧4h，置于干燥器中备用。 5.2，以水定容至500mL。 5.141%氨水-乙睛溶液：准确吸取40mL25%的氨水（5.4）至1000mL容量瓶，用乙睛（5.1）定容至 刻度，混匀。 5.151%乙酸-乙溶液：准确吸取10mL冰乙酸（5.3）至1000mL容量瓶，用乙（5.1）定容至刻度， 混匀。 5.1620%的乙-水溶液：准确吸取10mL乙睛（5.1），加人90mL水，混匀。 5. 171 色谱流动相1,0.1%甲酸-水溶液：取1mL甲酸（5.6）用去离子水定容到1000mL，混匀， 5.18 色谱流动相2,0.1%甲酸-甲醇溶液：取1mL甲酸（5.6）用甲醇（5.2）定容到1000mL，混匀。 5.19 QuEChERS吸附剂1（适用于猪肝和动物组织样品）：准确称取100mgPSA（5.8）、50mgCis （5.9）、20mgGCB（5.10）和400mg无水MgSO,（5.12），储存于25mL具螺旋盖聚丙烯离心管中，旋紧 管盖，置于干燥箱内备用。 5.20QuEChERS吸附剂2（适用于牛奶、水产品样品）：准确称取100mgPSA、40mgCi和600mg无 水MgSO4，储存于25mL具螺旋盖聚丙烯离心管中，旋紧管盖，置于干燥箱内备用。 5.21标准物质：β-受体激动剂类、雄性激素类、糖皮质激素类、雌性激素类、硝基咪唑类、镇静剂类、二 羟基苯甲酸内酯类、三苯甲烷类以及氯霉素标准物质的纯度均≥99%，参见附录A表A.1。 醇溶解定容至10.0mL，溶液浓度相当于100.0mg/L，一30℃冷冻保存，有效期为12个月。 5.24标准中间溶液：准确吸取1.0mL各标准贮备溶液（5.23），以甲醇稀释并定容于100mL棕色容 2