SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3144—2011 出口动物源食品中抗球虫药物残留量 检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of coccidiostat residues in foodstuffs of animal origin for export- LC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2011-09-09发布 2012-04-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3144—2011 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳大学。 本标准主要起草人：岳振峰、康海宁、肖陈贵、赵凤娟、陈小霞、沈金灿、葛丽雅、叶刚、郑宗坤、 高均丽。 行业标准信息服务平台 SN/T 3144—2011 出口动物源食品中抗球虫药物残留量 检测方法液相色谱-质谱/质谱法 1 范围 本标准规定了动物源食品中20种抗球虫药物残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于鸡肉、鸡肝、鸡蛋、牛肉、牛肝和牛奶中盐霉素、甲基盐霉素、莫能菌素、拉沙洛菌素、氯 羟吡啶、氨丙啉、乙氧酰胺苯甲酯、尼卡巴嗪、常山酮、克拉珠利、甲苄喹啉、癸氧喹酯、二硝托胺、马杜霉 素、地克珠利、硝米特16种抗球虫药物残留量的测定和确证；适用于鸡肉、鸡肝、鸡蛋、牛肉、牛肝和牛奶 中甲基三嗪酮、甲基三嗪酮砜、甲基三嗪酮亚砜及阿克洛胺4种抗球虫药物残留量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 采用乙睛提取试样中残留的抗球虫药物，乙饱和正已烷脱脂，提取液经硅胶柱净化，浓缩，液相色 谱-质谱/质谱检测和确证，外标法定量。 4试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为优级纯，水采用GB/T6682规定的一级水。 4.1乙睛：高效液相色谱纯。 4.2甲醇：高效液相色谱纯。 4.4 正已烷。 4.5 甲酸：高效液相色谱纯。 4.62 乙酸铵：高效液相色谱纯。 4.7 无水硫酸钠：优级纯，650℃购烧4h，置于干燥器中备用。 4.8 0.005mol/L乙酸铵水溶液（含0.05%甲酸）：准确称取0.3854g乙酸铵（4.6），用水溶解并转移 至1000mL容量瓶中，加入0.500mL甲酸（4.5），用水定容至刻度线。 4.9标准物质：抗球虫类药物标准品（具体信息见附录A）。 4.10标准储备液的配制：分别准确称取经纯度折算后的适量的每种标准物质，用甲醇（4.2）配制成浓 度为100mg/L的标准储备溶液，难溶于甲醇的标准品，先用N，N-二甲基甲酰胺（4.3）溶解，再用甲醇 稀释至刻度。该溶液应配制于棕色容量瓶中，一18℃以下避光可保存12个月。 4.11混合标准中间工作溶液的配制：根据需要分别准确移取一定体积的每种标准储备液，用甲醇稀释 成适当浓度的混合标准中间工作液。该溶液应配制于棕色容量瓶中，一18℃以下避光可保存6个月。 1 SN/T 3144—2011 4. 12 2硅胶固相萃取小柱：500mg，6mL。硅胶柱使用前先加人约0.5cm高度的无水硫酸钠（4.7），用 5mL乙睛活化，保持柱体湿润。 4.13微孔滤膜：0.22μm，有机相型。 5仪器和设备 液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2 旋转蒸发浓缩仪。 5.3走 超声波水浴。 5.4 固相萃取装置。 5.5均质器。 5.6） 旋涡混匀器。 分析天平：感量0.1mg和0.01g。 5.8 移液器：10μ~100μ和100μ1000μL。 聚丙烯离心管：50mL，15mL，2mL，具塞。 5. 10 容量瓶：100mL和1000mL。 5.11鸡心瓶：100mL。 5. 12 离心机：转速可达12000r/min，可设置离心温度低于10℃。 6试样制备与保存 6.1注意事项 在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 6.2鸡肉、鸡肝、鸡蛋、牛肉、牛肝 从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约500g，充分搅碎混匀，试样装入洁净容器中，密 封，并标明标记，于一18℃以下冷冻存放。 6.3牛奶 从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，装入洁净容器中，密封，并标明标记，于4℃冷藏 信息服务平 存放。 7分析步骤 7.1i 试样提取 7.1.1肌肉和肝脏 称取试样5g（精确至0.01g），置于50mL聚丙烯离心管中，根据样品含水量情况加入5g~10g 无水硫酸钠，加人15mL乙，均质3min，低温超声提取20min（温度低于10℃），3000r/min离心 5min（温度低于10℃），取上清液。残渣再加人15mL乙睛，重复上述提取过程一次，9500r/min离心 5min后合并上清液（温度低于10℃），加入10mL乙睛饱和正已烷液液萃取两次，弃去正已烷层，待 净化。 2