SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3032—2011 出口食品中三聚氰胺和三聚氰酸 检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of melamine and cyanuric acid in foodstuffs for export- HPLC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2011-09-09发布 2012-04-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3032—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共 和国深圳出入境检验检疫局、中华人民共和国湖北出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：邓晓军、赵善贞、郭德华、李淑娟、彭涛、靳宝辉、韩丽、盛永刚、赵晓亚、武巧彬、 张旖。 行业标准信息服务平台 SN/T3032—2011 出口食品中三聚氰胺和三聚氰酸 检测方法液相色谱-质谱/质谱法 1范围 奶油、冰淇淋、奶糖、饼干中三聚氰胺和三聚氰酸残留量的定量测定和确证。 2方法提要 试样中三聚氰胺和三聚氰酸残留采用乙睛和水提取，盐酸调节pH值至2.0～3.0后，乙睛饱和正 已烷脱脂，提取液经离子交换和硅胶复合固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱检测和确证，内标法 定量。 3试剂与材料 除非另有规定，均使用分析纯试剂，水为去离子水。 3.1乙腈：液相色谱级。 3.2甲醇：液相色谱级。 行业标准信 3.3正已烷：液相色谱级。 3.4甲酸：液相色谱级。 3.5甲酸铵。 3.6 盐酸。 3.7 氨水。 3.8 二乙胺。 乙腈十水（7+3，V+V²）：量取700mL乙腈和300mL纯水，混勺 3. 102 乙腈+水（5+5，Vi+Vz）：量取500mL乙腈和500mL纯水，混匀 3.111mol/L盐酸：准确量取83mL浓盐酸（3.6)用水稀释定容到1L。 3. 12 5%氨水甲醇：量取95mL甲醇和5mL氨水，混匀。使用前配制。 3.13100mmol/L甲酸铵+乙腈（1+9,Vi+Vz）pH3.2溶液：精确称取6.3g甲酸铵（3.5）溶解于 100mL纯水中，加入900mL乙腈混匀，用甲酸调节pH至3.2土0.1。 3.14含0.1%甲酸的乙腈：量取1L乙睛，加人1mL甲酸，混匀。 3.15标准物质：三聚氰胺（melamine，CAS号：108-78-1）、三聚氰胺同位素内标（15N：-melamine，CAS 号：287476-11-3）、三聚氰酸（cyanuricacid，CAS号：108-80-5）、三聚氰酸同位素内标（13C:-cyanuric acid，CAS号：201996-37-4），纯度均大于98%。 3.16标准储备液：分别精确称取三聚氰胺、三聚氰胺同位素内标的标准品（3.15）0.1g（精确到 0.0001g），用乙十水（3.10）溶解，稀释并定容于100mL容量瓶中，分别配制成浓度为1mg/mL的 标准储备溶液。该溶液应配制于棕色容量瓶中，一18℃以下避光保存。分别精确称取三聚氰酸、三聚 1 SN/T3032—2011 于100mL容量瓶中，分别配制成浓度为1mg/mL的标准储备溶液。该溶液应配制于棕色容量瓶中， 一18℃以下避光保存。 3.17标准中间储备溶液：准确移取100μL上述各标准储备液于100mL容量瓶中，用乙睛稀释定容， 分别配成1ug/mL的三聚氰胺、三聚氰酸、三聚氰胺同位素内标以及三聚氰酸同位素内标标准溶液，该 溶液应配制于棕色容量瓶中，一18℃以下避光保存。 3.18标准工作曲线：准确移取适量上述标准中间储备溶液（3.17），用乙睛甲酸铵溶液（3.13）配制成适 当浓度的混合标准工作曲线溶液，参考线性浓度范围为10ng/mL500ng/mL，三聚氰胺同位素内标 浓度为100ng/mL，三聚氰酸同位素内标浓度为200ng/mL，临用时现配。 3.19微孔滤膜：0.22μm，有机系。 3.20AnpelcleanMCT柱（亲水性键合硅胶和阳离子交换树脂复合填料）：3mL150mg或相当者。 4仪器和设备 4.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 4.2分析天平：感量0.0001g和0.01g。 4.3均质器。 4.4涡旋混匀器。 4.5超声波水浴。 4.6冷冻离心机：10000r/min。 4.7 固相萃取装置。 4.8氮吹仪。 5试样制备与保存 5.1猪肉、猪肝、猪肾、鸡蛋、虾、肠衣、饼干、奶糖 从所取全部试样中取出有代表性试样可食部分约500g，充分捣碎均匀，装入洁净容器中，密封，并 标明标记，于一18℃以下冷冻存放。肠衣试样在提取前先用去离子水洗，去盐。 5.2蜂蜜、液态奶、奶粉、豆奶、豆粉、蛋白粉、炼乳、奶酪、奶油、冰淇淋 服务平台 从所取全部试样中取出有代表性试样约500g，装入洁净容器中，密封，并标明标记，于4℃冷藏 存放。 注：在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化 6测定步骤 6.1提取 6. 1. 1猪肉、虾、肠衣、猪肝、猪肾、鸡蛋 称取均质试样2g（精确至0.01g），置于50mL塑料离心管中，分别加人200uL的三聚氰胺同位素 内标溶液（3.17）和400μL的三聚氰酸同位素内标溶液（3.17），鸡蛋试样中添加1mL去离子水和7ml 使用者提供方便，而不是标准主管部门对这一产品的认可。 2