SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2922—2011 出口食品中EPA和DHA的测定 气相色谱法 Determination of eicosapentaenoic acid(EPA)and docosahexaenoic acid(DHA)in foods for export- Gas chromatography 行业标准信息服务平台 2011-05-31发布 2011-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2922—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：陈捷、叶弘毅、陈文锐、谢守新、林海丹 行业标准信息服务平台 I SN/T 2922—2011 出口食品中EPA和DHA的测定 气相色谱法 1范围 本标准规定了出口鱼油和鱼油复合胶囊制品中顺式-5，8，11，14，17-二十碳五烯酸（简称EPA）、顺 式-4，710，13，16，19-二十二碳六烯酸（简称DHA）的气相色谱测定方法。 本标准适用于鱼油和鱼油复合胶囊制品中EPA、DHA含量的测定。 2方法提要 样品中EPA、DHA甘油酯和游离的EPA、DHA，经氢氧化钠甲醇溶液和三氟化硼甲醇溶液甲酯 化，采用气相色谱附氢火焰离子检测器（FID)检测，内标法定量。 3试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为去离子水。 3.1异辛烷。 3.2甲醇。 3.3氢氧化钠。 3.4氯化钠。 3.5 三氟化硼甲醇溶液：BF：，12%三氟化硼甲醇溶液。 3.6 氢氧化钠甲醇溶液：0.5mol/L，称取2.0g氢氧化钠，加100mL甲醇溶解。 3.7 饱和氯化钠溶液：36g氯化钠，溶于100mL水中。 3.8 标准物质 3.8.1二十三酸甲酯：CAS编号2433-97-8.纯度≥99.0%，内标物。 3.8.2 顺式-5，8，11，14，17-二十碳五烯酸甲酯：CAS编号2734-47-6，纯度≥99.0%。 3.8.3顺式-4，7,10，13，16，19-二十二碳六烯酸甲酯：CAS编号301-01-9，纯度≥99.0%。 3.9标准溶液配制 3.9.1二十三酸甲酯储备液：准确称取适量二十三酸甲酯（精确到0.0001g），用异辛烷溶解，配制成 浓度为1.00mg/mL的内标储备液。 3.9.2EPA甲酯储备液：准确称取适量EPA甲酯（精确到0.0001g），用异辛烷配制成浓度为 10.0mg/mL的标准储备液 3.9.3DHA甲酯储备液：准确称取适量DHA甲酯（精确到0.0001g），用异辛烷配制成浓度为 10.0mg/mL的标准储备液 注：上述标准溶液应于一18℃冰箱中保存，保存期六个月。 4仪器和设备 4.1气相色谱仪：配有火焰离子化（FID)检测器。 1 SN/T 2922—2011 4.2 天平：感量0.0001g。 4.3涡旋振荡器。 4.4恒温箱。 4.5氮气吹干仪。 4.6顶空进样瓶或玻璃试管：25mL，带聚四氟乙烯垫旋盖。 4.7玻璃刻度试管：5.0mL，具塞。 5测定步骤 5.1准确移取2.0mL二十三酸甲酯（3.9.1)内标液（相当于内标物2.0mg）于顶空进样瓶中，用氮气 吹干，待用。如果不即时使用，应冷冻储存。 5.2称取试样（胶囊内含物）0.02g（精确至0.0001g）于含有内标的顶空进样瓶（5.1)中，加1.5mL 0.5mol/L氢氧化钠甲醇溶液（3.6），充人氮气，加盖密封，涡旋振荡混匀，100℃下加热5min，冷却，加 2mL三氟化硼甲醇溶液（3.5），充入氮气，加盖密封，涡旋振荡混匀，100℃下加热30min，冷却至 30℃~40℃，注入1mL异辛烷，趁热涡旋振荡30s，再注人5mL饱和氯化钠溶液（3.7），涡旋振荡，冷 却至室温，静置分层，将异辛烷层移人玻璃刻度试管，充人氮气，加盖。在水相中再加入1mL异辛烷， 重复萃取一次，合并异辛烷提取液，通氮气浓缩并定容至1.0mL，待测。 5.3标准系列工作液配制：准确移取EPA甲酯（3.9.2）和DHA甲酯（3.9.3）适量（分别相当于EPA 甲酯和DHA甲酯0.02mg、0.5mg、1.0mg、2.0mg、4.0mg、10mg），按5.2操作。配制成标准系列工 作液，EPA甲酯和DHA甲酯的浓度依次为0.02mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL、2.0mg/mL、 4.0mg/mL、10.0mg/mL,内标浓度为2.0mg/mL。 5.4测定 5.4.1气相色谱条件 5.4.1.1色谱柱：DB-23毛细管柱，60mX0.25mm（内径）X0.15μm，或性能相当者。 3 ℃ /min 5.4.1.2升温程序：150℃(2min) 5.4.1.3进样口温度：250℃。 5.4.1.4检测器温度：280℃。 5.4.1.5载气：氢气（纯度99.999%），流量2.0mL/min。 5.4.1.6进样模式：分流进样，分流比30：1。 5.4.1.7进样量：1.0μL。 5.4.2气相色谱测定 内标法定量：标准工作溶液（5.3)和样液等体积参插进样测定。以标准溶液中被测组分峰面积和二 十三酸甲酯峰面积的比值为纵坐标，标准溶液中被测组分浓度与二十三酸甲酯浓度的比值为横坐标绘 制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，标准工作溶液和样液中待测物响应值均应在仪器检 27.9min。标准品的色谱图参见图A.1。 6结果计算和表述 用色谱数据处理机或按式（1)计算试样中EPA或DHA的含量。 X,=XV .(1) mXk 2