SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2982—2011 牙鲆弹状病毒病检疫技术规范 Quarantine protocol for hiramerhabdovirus disease 行业标准信息服务平台 2011-09-09发布 2012-04-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 行业标准信 中华人民共和国出人境检验检疫 行业标准 SN/T2982—2011 * 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 网址www.spc.net.cn 电话：6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 开本880×12301/16 6印张0.75字数15千字 2012年3月第一版 2012年3月第一次印刷 印数1—1600 * 书号：155066·2-22965 定价16.00元 SN/T2982—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、中华人民 共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。 叶奕优、陈兵。 行业标准信息服务平台 SN/T 2982—2011 牙鲆弹状病毒病检疫技术规范 1范围 本标准规定了牙鲆弹状病毒病病原分离、酶联免疫吸附试验和聚合酶链式反应检测方法。 本标准适用于牙鲆弹状病毒病的检疫。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T18088出入境动物检疫采样 3概述 牙鲆弹状病毒病（hiramerhabdovirusdisease；HRVD）是由牙鲆弹状病毒（hiramerhabdovirus； HRV)引起的一种海水鱼类疾病，主要危害牙鲆等海水鱼类（参见附录A） 4试剂和材料 4.1HRV参考株。 4.2细胞系：BF-2（铜吻鳞鳃太阳鱼细胞系）、FHM（海水鲤科鱼类细胞系）、EPC（鲤鱼上皮瘤细胞系）、 CHSE-214（大鳞大麻哈鱼胚胎细胞系）。用199培养液（见附录B.2）培养。 4.3HEPES:4-羟乙基哌嗪乙磺酸。 4.4HRV参考抗血清（单克隆抗体）。 4.5免抗HRV抗体。 4.6酶标羊抗鼠IgG：按照说明书使用 4.7 引物：浓度为40μmol/L。其序列如下： GF:5'-GTG-CCA-ATG-GTA-CAC-GGA-CAA-3" GR:5'-TGA-TCT-CCG-CAT-GTG-CCT-CTA-3 扩增HRV糖蛋白G基因中515bp的片段。 5号 器材和设备 5.1酶标测定仪。 5.2倒置显微镜。 5.3恒温培养箱。 5.4PCR扩增仪。 5.5凝胶成像仪。 1