SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2748—2010 进出口动物源性食品中多肽类兽药 残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of peptide vererinary drug residues in foodstuffs of animal origin for import and exportLC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2010-11-01发布 2011-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2748—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局， 本标准主要起草人：孙兴权、田苗、林维宣、肖珊珊、董伟峰、于灵。 行业标准信息服务平台 SN/T2748—2010 进出口动物源性食品中多肽类兽药 残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了进出口动物源性食品中杆菌肽A、粘杆菌素A、粘杆菌素B和维吉尼霉素M1残留量 测定液相色谱-质谱/质谱检测方法 量的检测和确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 样品用0.1%甲酸-甲醇混合溶液提取，提取液经正已烷萃取脱脂，固相萃取柱净化，液相色谱-质 谱/质谱测定和确证，外标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1乙：高效液相色谱级。 4.2甲醇：高效液相色谱级。 4.3甲酸：高效液相色谱级。 4.4正已烷：高效液相色谱级。 4.5盐酸。 4.70.1%甲酸水溶液：取1mL甲酸，用水稀释至1000mL。 4.80.1%甲酸-甲醇溶液（5+2，体积比）：0.1%甲酸水溶液（4.7)500mL与200mL甲醇（4.2）混溶 即可。 4.90.1%甲酸-甲醇溶液（4+1，体积比）：0.1%甲酸水溶液（4.7400mL与100mL甲醇（4.2）混溶 即可。 4.100.1%甲酸-甲醇溶液饱和正已烷：500mL0.1%甲酸-甲醇溶液（4.8）中加入100mL正已烷 （4.4），充分振荡混合，静置备用。 4.11多肽类标准品：杆菌肽A、粘杆菌素和维吉尼霉素M1标准品纯度均大于等于95%，标准品信息 见附录A表A.1。 4.12多肽类标准储备溶液：称取适量标准品（4.11），分别用0.1%甲酸-甲醇溶液（4.9）溶解（超声助 溶），配制成浓度为500μg/mL的标准储备溶液，于4℃避光保存。 1 SN/T 2748—2010 4.13混合标准储备液：分别吸取适量的杆菌肽A、粘杆菌素和维吉尼霉素M1标准储备液，用0.1% 甲酸-甲醇溶液（4.9）配制成混合标准储备液。使得混合标准储备液中杆菌肽A、粘杆菌素和维吉尼霉 素M1的浓度分别为50μg/mL12.5μg/mL、10μg/mL，于4℃避光保存。 成一系列混合标准工作液，于4℃避光保存。 4.15固相萃取柱：WatersoasisHLB柱，500mg，6mL，或相当者。 4.16微孔滤膜：0.45μm，有机相。 5仪器和设备 5.1高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。 5.2分析天平：感量分别为0.1mg和0.01g。 5.3组织捣碎机。 5.4均质器：10000r/min。 5.5离心机:8500r/min。 5.6旋涡混合器。 5.7 固相萃取装置。 5.8氮吹仪。 5. 9 具塞离心管：聚丙烯，50mL。 61 试样制备与保存 6.1猪肉、猪肝和猪肾 取猪肉、猪肝和猪肾的可食部分约500g代表性样品，用组织捣碎机充分捣碎，均分成两份，分别装 入洁净容器中，密封，并标明标记。 6.2牛奶 取约500g样品，充分均匀，均分成两份，分别装人洁净容器中，密封，并标明标记。 6.3样品保存 猪肉、猪肝和猪肾试样于一18℃下冷冻避光存放；牛奶试样于4℃下避光存放。 7测定步骤 7.1提取 7.1.1肌肉、肝脏、肾脏样品 称取5g试样（精确到0.01g）于50mL具塞塑料离心管（5.9）中，加入0.1%甲酸-甲醇溶液（4.8） 10mL0.1%甲酸-甲醇溶液（4.8），重复以上提取操作。合并两次提取液，加人0.1%甲酸-甲醇溶液饱 和正已烷（4.10）10mL，涡旋振荡2min，4000r/min离心5min，弃去上层液（正已烷层），再加人正已烷 （4.10）10mL，重复以上脱脂操作，所得下层液待净化。 2