SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 26772010 进出口动物源性食品中雄性 激素类药物残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of androgen residues in foodstuffs of 业标准信息服务平台 animal origin for import and export-LC-MS/MS method 2010-11-01发布 2011-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2677—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国深圳出人境检验检疫 局、中国检科院。 本标准主要起草人：林黎明、张鸿伟、陈亮珍、杜明、孟庆贺、岳振锋、彭涛、庞士平、包大勇 行业标准信息服务平台 SN/T2677—2010 进出口动物源性食品中雄性 激素类药物残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 确证方法。 本标准适用于蜂蜜、牛奶、猪肾、猪肝和猪肉中去甲雄三烯醇酮、去氢睾酮、19-去甲睾酮、睾酮、脱氢 表雄酮、雄烯二酮和表睾酮等七种雄性激素类药物残留量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样经酶解，乙睛提取样品中七种雄性激素类药物残留，固相萃取柱净化，浓缩，液相色谱-质谱/质 谱测定，内标法定量。 4试剂和材料 怡息服务平台 除另有规定外，所有试剂均为分析纯；水为GB/T6682规定的一级水。 4.1乙睛，色谱级。 4.2正已烷，色谱级。 4.3丙酮，色谱级。 4.4甲醇，色谱级。 4.5正丙醇，色谱级。 4.67 β葡糖苷硫酸酯酶（葡萄糖苷酶：117800unit/mL；硫酸酯酶：1008unit/mL） 4.7 硅藻土。 4.8 丙酮-水溶液（20十80，体积比）：取丙酮（4.3）20mL，水80mL，混合后振摇混匀 4.9乙饱和的正已烷溶液：取正已烷（4.2）200mL于250mL分液漏斗中，加入少量乙腈（4.1），剧 烈振摇数分钟，静止分层后弃下层乙睛层即得。 4.10乙睛-水溶液（10十90，体积比）：取乙睛（4.1)10mL，水90mL，混合后振荡混匀。 4.11[ 固相萃取柱：C1s柱，500mg，6mL或相当者，使用前用5mL甲醇，5mL水活化。 4.12[ 固相萃取柱：NHz柱，500mg，6mL或相当者，使用前用5mL乙睛活化。 4.13 标准物质和内标：去甲雄三烯醇酮、去氢罩酮、19-去甲罩酮、睾酮、脱氢表雄酮、雄烯二酮、表罩酮 1 SN/T 2677—2010 等标准物质，纯度≥98%；睾酮-Dz和脱氢表雄酮-Dz内标物质：纯度97% 4.14标准溶液： 4.14.1标准储备溶液：分别准确称取适量七种雄性激素相应化合物标准物质（4.13），用甲醇溶解定容 至50mL，得质量浓度分别为1000μg/mL的标准储备溶液。在一18℃以下，有效期12个月。 4.14.2混合标准中间液：准确吸取各种雄性激素类标准储备液（4.14.1）适量，用甲醇准确稀释到去甲 雄三烯醇酮、去氢睾酮、19-去甲睾酮、睾酮、雄烯二酮、表睾酮的浓度为10μg/mL，脱氢表雄酮的浓度为 50ug/mL，在一18℃以下，有效期9个月。 4.14.3氛代内标储备溶液：分别准确称取适量睾酮-D²和脱氢表雄酮-D2标准物质（4.13），用甲醇溶 解定容至50mL，得质量浓度分别为1000μg/mL的氛代内标储备溶液，在一18℃以下，有效期 12个月。 4.14.4混合氛代内标中间溶液：准确吸取2种氛代内标储备液（4.14.3）适量，用甲醇准确稀释到罩 酮-D2的浓度为10μg/mL，脱氢表雄酮-Dz的浓度为50μg/mL，在一18℃以下，有效期9个月。 4.14.5混合标准工作液：标准工作液根据需要使用前用空白样品基质提取溶液配制，空白样品基质溶 液采用相应的无残留基质样品参照7.1.1、7.1.2、7.2所述操作步骤操作。该溶液使用前配制。 4.14.6混合氛代内标工作溶液：分别准确吸取混合氛代内标中间液（4.14.4)适量，用甲醇准确稀释到 睾酮-Dz的浓度为20μg/L，脱氢表雄酮-Dz的浓度为500μg/L作为氙代内标工作溶液。该溶液使用前 配制。 4.15微孔滤膜：0.22μm。 5仪器和设备 5.1 液相色谱-质谱/质谱仪或相当者：配有电喷雾离子源。 5.2固相萃取装置。 5.3旋涡混合器。 5.5 螺旋盖聚丙烯离心试管，50ml 5.6 组织捣碎机。 5.7均质器。 5.8超声波仪。 5.9吹氮浓缩仪。 5.10恒温水浴振荡器。 6样品制备与保存 6.1动物内脏、肌肉 从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约500g，用组织捣碎碎机充分捣碎均匀，均分成两 份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于一18℃以下冷冻存放。 6.2牛奶、蜂蜜样品 标明标记，于一18℃以下冷冻存放。 在操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 2