SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2654—2010 进出口动物源性食品中吗琳胍残留量 检测方法 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of moroxydine residue in foodstuffs of animal origin for importandexport-LC-MS/MSmethod 行业标准信息服务平台 2010-11-01发布 2011-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2654—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国河南出入境检验检疫局、中华人民共和国重庆出入境检验检 疫局。 本标准主要起草人：杨冀州、王国民、祝伟霞、郭俊峰、刘亚风、魏蔚、刘毅。 行业标准信息服务平台 SN/T2654—2010 进出口动物源性食品中吗琳胍残留量 检测方法液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了动物源性食品中吗啉胍残留量的制样方法与液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾、牛肉、牛肝、牛肾、鸡肉、鸡肝、鸡肾、鱼肉和虾仁中吗啉胍残留量的 液相色谱-质谱/质谱的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3试样的制备与保存 取样品中具有代表性的可食部分500g，用组织捣碎机充分捣碎，均分成两份分别装入洁净容器，密 封并做好标识，于一18℃以下保存。 制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 4方法提要 样品中残留的吗啉胍经三氯乙酸溶液提取并沉淀蛋白，肝脏样品需先过C：固相萃取柱净化，其他 基质样品直接加人庚烷磺酸钠离子对试剂进行固相萃取净化，液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。 信息服务平台 5试剂和材料 除特别规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水 5.1乙睛：高效液相色谱级 5.2甲醇：高效液相色谱级。 5.3庚烷磺酸钠：高效液相色谱级。 5.4 乙酸胺：高效液相色谱级。 5.5三氯乙酸。 5.6冰乙酸。 5.75%三氯乙酸溶液：称取5.0g三氯乙酸（5.5），溶于100mL水中。 5.80.5mol/L庚烷磺酸钠溶液：称取10.1g庚烷磺酸钠（5.3），溶于100.mL水中。 5.95%甲醇水溶液（5十95，体积比）：量取50mL甲醇950mL水混合。 5.1020mmol/L乙酸胺缓冲溶液：称取1.54g乙酸胺（5.4），溶于700mL~800mL水中，用乙酸调 节pH4.0后用水定容至1000mL。 1 SN/T2654—2010 5.12盐酸吗琳胍标准品（moroxydinehydrochloride）：CAS编号3731-59-7，含量大于等于99%。 啉呱标准储备液。此溶液在0℃～4℃避光保存，可使用3个月。 5.14吗啉胍中间标准液：准确吸取0.5mL标准储备液（5.13），用甲醇定容至100mL，浓度为 500ng/mL。此溶液在0℃～4℃避光保存，可使用1个月。 5.15吗啉胍标准工作液：根据需要吸取适量吗啉胍中间标准溶液（5.14），用空白样品提取液稀释成适 当浓度的基质工作溶液，使用前配制。 5.16OasisHLB固相萃取柱：3mL，60mg，或相当者；使用前用3mL甲醇和3mL水活化，并保持柱 体湿润。 5.17Cis固相萃取柱：3mL，200mg，或相当者；使用前分别用3mL甲醇和3mL水活化，并保持柱体 湿润。 5.180.22μm滤膜：有机相。 6仪器和设备 6.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 6.2分析天平：感量0.1mg.0.01g。 6.3涡旋混匀器。 6.4离心机：4000r/min。 6.5固相萃取装置。 6.6氮吹仪。 6.7组织捣碎机。 行业标准信 7 测定步骤 7.1提取与净化 7.1.1肌肉、肾脏、鱼肉、虾肉 称取约2g试样（精确到0.01g）于50mL具塞离心管中，加人20mL三氯乙酸溶液（5.7），涡旋混 匀3min，加0.5mL庚烷磺酸钠溶液（5.8）至样液中，混匀后于4000r/min高心10min。 过固相萃取柱，依次用3mL水、3mL甲醇溶液（5.9）淋洗固相萃取柱，弃去全部流出液，在65kPa负压 下抽干固相萃取柱5min，用3mL甲醇洗脱被测物，洗脱液于45℃水浴中氮吹浓缩至干，0.5mL乙酸 7. 1.2肝脏 称取约2g试样（精确到0.01g）于50mL具塞离心管中，加人20mL三氯乙酸溶液（5.7），涡旋混 匀3min，于4000r/min离心10min。移取5.0mL上清液，以小于1mL/min的流速通过Cis固相萃取 柱（5.17），用3mL水淋洗C18柱，收集全部流出液。向流出液中加入0.2mL庚烷磺酸钠溶液（5.8），涡 旋混匀30s后离心，取全部上清液以小于1mL/min的流速通过HLB固相萃取柱，待样液全部流过固 相萃取柱后，用3mL水、3mL5%甲醇溶液淋洗固相萃取柱，弃去全部流出液，在65kPa负压下抽干固 相萃取柱5min，用3mL甲醇洗脱被测物，洗脱液于45℃水浴中氮吹浓缩至干，0.5mL乙酸胺缓冲溶 2