SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 25802010 进出口蜂王浆中16种磺胺类 药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of sixteen sulfonamides residues in royal jelly for import and export-LC-MS/MS 业标准信息服务平台 2010-05-27发布 2010-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2580—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国浙江出入境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人：谢文、陈笑梅、丁慧瑛、奚君阳、韩超、张慧敏。 行业标准信息服务平台 SN/T2580—2010 进出口蜂王浆中16种磺胺类 药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了蜂王浆中16种磺胺类药物残留测定的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于蜂王浆中磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺-5- （对）甲氧嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺-6-（间）甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、 磺胺甲基异恶唑、磺胺二甲异恶唑、苯酰磺胺、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺喹嗯啉残留量的检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 用甲醇沉淀样品中蛋白质，上清液用乙酸乙酯提取，再用MCX和C18固相萃取小柱净化，液相色 4试剂和材料 怡息服务平台 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1乙睛：高效液相色谱级。 4.2甲醇：高效液相色谱级。 4.3乙酸乙酯：高效液相色谱级。 4.4甲酸：高效液相色谱级 4.5氯化钠。 4.6氨水25%~28%。 4.75%氨水甲醇溶液：氨水-甲醇（5十95，体积比）。 4.8磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基啶、磺胺-5-（对）甲氧嘧啶、磺胺甲噻 二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺-6-（间)甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺甲基异恶唑、磺胺二 甲异恶唑、苯酰磺胺、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺喹啉、磺胺嘧啶-D4、磺胺二甲基嘧啶-D4、磺胺二甲氧嘧 啶-D4标准品：纯度大于等于98%，见附录A表A.1。 4.9标准储备溶液：分别称取经折算适量标准品（4.8）（精确至0.1mg），分别用甲醇溶解定容至 100mL，溶液浓度为100μg/mL，1℃～4℃冰箱保存。有效期3个月。 4.10磺胺嘧啶-D4、磺胺二甲基嘧啶-D4、磺胺二甲氧嘧啶-D4标准储备溶液：分别称取标准品（4.8）， 1 SN/T 2580—2010 分别用甲醇溶解定容至100mL，溶液浓度为100μg/mL，1℃~4℃冰箱保存 4.11空白样品提取液：用不含16种磺胺药物的蜂王浆样品，按照第7章制备空白样品溶液。 4.12标准工作溶液：根据需要用空白样品提取液（4.11)）将标准储备液稀释成浓度为1ng/mlL、 1.25ng/mL、2.5ng/mL、5ng/mL、12.5ng/mL的混合标准工作溶液，相当于样品中含有4ug/kg、 5ug/kg、10μug/kg、20ug/kg、50ug/kg磺胺类药物。内标溶液浓度均为1ng/mL。 4.13MCX固相萃取小柱，500mg，3mL或相当者。使用前依次用5mL甲醇，5mL水预洗。 4.14Cig固相萃取小柱，500mg，3mL或相当者。使用前依次用5mL甲醇预洗。 4.15微孔滤膜：0.45m，有机相。 5仪器和设备 5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。 5.2天平：感量为0.0001g和0.01g。 5.3固相萃取装置。 5.4离心机：大于等于6000r/min。 5.5旋涡混合器。 5.6减压浓缩仪。 5.7具塞离心管：聚四氟乙烯，50mL。 6试样制备与保存 样品瓶中，密封，并标明标记。一份作为试验样，另一份在一18℃保存。在制样的操作过程中，应防止 样品污染或发生残留物含量的变化。 业标准信 7测定步骤 7.1提取 称取2g试样（精确到0.01g）置于50mL具塞离心管中，加0.1mL同位素内标溶液（40ng/mL）， 和10mL水，混匀，静置2min，再加甲醇至20mL，于旋涡混合器上以2000r/min混匀1min，以 6000r/min离心5min，移取10.0mL上清液，加10mL水，混勾，加2g氯化钠和20mL乙酸乙酯提 近干。 7.2净化 用20mL水溶解残渣，将溶液转移至MCX固相萃取小柱中（4.13），弃去流出液，加5mL甲醇-水 （1+1，体积比）淋洗，抽干，用8mL5%氨水甲醇（4.7）洗脱，控制流速1mL/min~2mL/min，收集全部 洗脱液，在50℃以下水浴下减压浓缩至近干，10mL甲醇将残渣溶解并全部转移至C1s固相萃取小柱 中（4.14），控制流速1mL/min～2mL/min，收集全部流出液，50℃以下水浴中减压浓缩至近干，用 4.0mL甲醇-0.15%甲酸（3+7，体积比）溶解残渣，混匀，溶液过0.45um，滤膜，供液相色谱-质谱/质谱 仪测定。 2