SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2544—2010 甘油含量的测定 高效液相色谱法 Determination of content in glycerine- High performance liquid chromatography 行业标准信息服务平台 2010-09-16实施 2010-03-02发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2544—2010 前言 本标准的附录 A、附录B、附录 C是资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局。 本标准起草人：孙敦伟、吴晓红、张琳、邵敏。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T2544—2010 甘油含量的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了甘油含量的液相色谱测定方法。 本标准适用于不同含量规格的皂化甘油和合成甘油含量的测定 本标准也适用于定性鉴别掺有乙二醇、二甘醇、三甘醇和山梨醇等为主要原料的甘油替代品。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准， GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（ISO3696：1987，MOD） 3方法提要 本方法采用氨基键合柱、反相色谱分离法，在备有示差折光检测器（RID)的高效液相色谱仪上，用 外标法进行定量测定。 4试剂和材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂，实验所用水应符合GB/T6682中一级水要求。 4.1乙睛：HPLC级。 4.2流动相：乙睛+水，85+15（V/V）。 4.3甘油标准品：已知含量。 4.4针头式尼龙质过滤器：0.45μm，直径13mm。 4.5 尼龙质或再生纤维素质过滤膜：0.45um，直径47mm。 5仪器 5.1高效液相色谱仪、 5.2 检测器：示差折光检测器，并带有致冷热柱温箱 稻息服务平台 色谱柱：NH²柱，250mmX4.6mm(i.d.）,5μm或相当者 5.3 5. 4 超声仪。 5.5 容量瓶，50mL和100mL。 5.6 分析天平，感量0.1mg。 5.7 液体称量瓶，25mL。 6 色谱操作条件 6.1流动相：乙睛+水，85+15（V/V)（4.2），在线脱气或经当天预先脱气； 6.2流速：1.0mL/min; 6.3 柱温：30.0℃； 6.4 RID温度：35.0℃； 6.5进样量：10.0μL，用流动相洗针。 SN/T 2544—2010 注：上述液相色谱条件系通用的操作参数，可根据不同仪器的特点，对给定操作参数作适当调整，以期获最佳分离 效果。附录A提供了"Agilent1100十G1362A”系统和Waters2695+2414”系统的典型色谱条件。有关甘油与 甘醇及山梨醇的液相色谱法定性鉴别试验参见附录B。 7测定步骤 7.1标准溶液的配制 称取甘油标准品（4.3)约0.1g（精确至0.0002g），置于50mL容量瓶中，用流动相（4.2)稀释至刻 度，摇匀后在超声波水浴中超声约5min。于0℃～5℃存放，有效期半年。 7.2试样溶液的配制 称取含相当于标准品约0.1g的试样（精确至0.0002g），置于50mL容量瓶中，用流动相（4.2）稀 释至刻度，摇匀后在超声波水浴中超声5min。经0.45μm针头式尼龙质过滤器（4.4)过滤 7.3测定 在上述操作条件下，用流动相平衡系统，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针峰面积响 应值的重复性，待相邻两针的峰面积响应值变化小于1.0%时，则可测定样品。 丙三醇的液相色谱图参见附录C的图C.3。 8结果计算 按式（1)计算样品中丙三醇的含量Y，以质量分数计，单位为克每千克（g/kg）： A样Xm标×P Y .(1) A标Xm样 式中： Y 样品中丙三醇的含量，以质量分数计，单位为克每千克（g/kg）； A标 两针标样溶液中丙三醇峰面积的平均值； A样 两针试样溶液中丙三醇峰面积的平均值； 丙三醇标样的质量，单位为克（g）； m标 样品的质量，单位为克（g）； m样 P 丙三醇标样的含量，单位为克每千克（g/kg）。 9精密度 在8个实验室，对3个规格水平的试样进行方法精密度试验，结果见表1。 表1方法精密度 单位：g/kg 甘油规格 重复性 再现性 水平（质量分数） S. "s R9s 066 6.801 19.04 6.801 19.04 7.818 21.89V 7.818 21.89 810 9.231 25.86 9. 267 25.95