SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2325—2009 进出口食品中四唑嘧磺隆、甲基苯苏呋安、 醚磺隆等45种农药残留量的检测方法 高效液相色谱-质谱/质谱法 Determination of 45 pesticides residues including azimsulfron, bensulfron-methyl,cinosulfron et al in foods for import 业标准信息服务平台 and exportHPLC-MS/MS method 2009-07-07发布 2010-01-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2325—2009 前言 本标准的附录A、附录B均为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国河北出入境检验检疫局、中华人民共和国天津出人境检验检 疫局。 本标准主要起草人：王凤池、艾连峰、郭春海、陈瑞春、李成成、林安清。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T2325—2009 进出口食品中四唑嘧磺隆、甲基苯苏呋安、 醚磺隆等45种农药残留量的检测方法 高效液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了食品中四唑嘧磺隆、甲基苯苏呋安、醚磺隆等45种农药残留量的高效液相色谱-质 谱/质谱检测方法及样品的制备和保存方法 本标准适用于糙米、大米、玉米、大麦和小麦中氟唑嘧磺草胺、醚磺隆、咪草酸、甲基噻盼磺隆、烟嘧 磺隆、灭草喹、萘草胺、甲氧磺草胺、氯酯磺草胺、丙苯磺隆、甲磺草胺、甲酰胺磺隆、甲基胺苯磺隆、玉嘧 磺隆、苯磺隆、三氟啶磺隆、四唑嘧磺隆、芋嘧磺隆、嘧啶磺隆、乙磺隆、氯嘧磺隆、咪唑磺隆、苯并双环酮、 乙氧嘧磺隆、环丙嘧磺隆、吡嘧磺隆、恶草酸、双氟磺草胺、醚苯磺隆、甲磺隆、氯磺隆、五氟磺草胺、双氯 磺草胺、甲基碘磺隆、烯草酮砜、甲磺胺磺隆、氟磺隆、杀鼠灵、2-甲-4-氯丙酸、氟嘧磺隆、氟磺胺草醚、氟 胺磺隆、氯吡嘧磺隆、达诺杀和特乐酚45种农药残留量的检测。 2方法提要 试样用水-丙酮提取，提取液经二氯甲烷液液萃取后，用凝胶渗透色谱净化，用高效液相色谱-质谱 质谱测定，外标法定量。 3试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为去离子水。 3.1甲醇，色谱纯。 3.2甲酸，色谱纯。 行业标 3.3环已烷。 3.4乙酸乙酯。 3.5 丙酮。 3.6 二氯甲烷。 3.7 氯化钠。 3.8 无水硫酸钠：经650℃灼烧4h，置于干燥器内备用 3. 9 15%氯化钠水溶液：准确称确150g氯化钠，用水溶解并定容到1L容量瓶中，混合均匀。 3.10 乙酸乙酯-环已烷（50十50，体积比）：等体积的乙酸乙酯和环已烷互溶。 3.11甲醇十水（50十50，体积比）：等体积的甲醇和水互溶 天于等于98%。 3.13标准储备液：准确称取适量的农药标准品，用少量的丙酮溶解，并以丙酮配制成浓度为100μg/mL 的标准储备液，一18℃避光保存6个月。 3.14混合标准工作液：吸取适量标准储备溶液（3.13），用甲醇稀释成杀鼠灵为0.2μg/mL，其余44种 农药为1ug/mL的混合标准工作溶液，一18℃避光保存3个月。 3.15基质混合标准工作液：根据需要，吸取一定量的混合标准工作液（3.14），用基质空白液稀释至所 需浓度，临用前配制。 3.16硅藻土，cellite545。 1 SN/T 2325—2009 3.170.22μm有机滤膜。 4仪器和设备 4.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI)。 4.2凝胶渗透色谱。 4.3振荡器。 4.4旋转蒸发器。 4.5氮吹仪。 5试样的制备和保存 取代表性样品约1kg，用磨碎机全部磨碎并通过20目筛。混匀，均分成两份作为试样，分装人洁浮 的盛样瓶内，密闭，标明标记。将试样于0℃～4℃避光保存。 在制样的操作过程中，应防止样品受到污染及发生残留物含量的变化。 6测定步骤 6.1提取 称取试样5g（精确到0.01g）于150mL具塞锥形瓶中，加人0.5g硅藻土（3.16）和15mL去离子 水，浸泡20min后加入50mL丙酮，在振荡器上振荡提取30min，抽滤至浓缩瓶中。在40℃水浴中将 提取液浓缩至约20mL，转移至分液漏斗中，再用30mL二氯甲烷分三次洗涤浓缩瓶，合并至同一分液 漏斗中，然后加人15mL氯化钠溶液（3.9），振摇萃取2min，静置分层。将二氯甲烷层经5g无水硫酸 钠过滤至浓缩瓶中。用20mL二氯甲烷重复萃取一次，合并二氯甲烷于同一浓缩瓶中。将合并的二氯 甲烷萃取液在45℃下旋转蒸发至近干，用10mL乙酸乙酯-环已烷（3.10）溶解残渣备净化 6.2净化 6.2.1凝胶色谱条件 a) 净化柱：S-X3Bio-Beads填料，粒度38μm~75μm，300mmX25mm（内径），或相当者； b) 流动相：乙酸乙酯-环已烷（3.10），流速：5.0mL/min； c) 进样量：5mL； d) 净化程序：0min~19min弃去淋洗液，19min~30min收集淋洗液。 6.2.2净化过程 5mL乙酸乙酯-环已烷溶解液进凝胶色谱系统，按6.2.1的条件净化。将收集的洗脱液45℃水浴 中浓缩至约2mL,然后用氮气吹干。准确加入1.0ml甲醇十水（3.11)溶解残渣，经0.22μm有机滤膜 （3.17）过滤备液相色谱-质谱/质谱测定。 6.3测定 6.3.1 液相色谱条件 a) 色谱柱：C18150mmX2.1mm（内径），粒度5μm，或相当者； b) 色谱柱温度：30℃； c) 进样量：10μL； d) 流动相梯度及流速见表1。 表1液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/（uL/min） 0.1%甲酸水溶液/% 甲醇/% 0.00 200 80 20 8.00 200 40 60 12.0 200 40 60 14.0 200 10 90 2