SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2318—2009 动物源食品中地克珠利、妥曲珠利、妥曲 珠利亚砜和妥曲珠利砜残留量的检测 高效液相色谱-质谱/质谱法 Determination of diclazuril,toltrazuril,toltrazuril sulfoxide and toltrazuril sulfone residues in foodstuffs of animal origin- 行业标准信息服务平台 HPLC-MS/MS method 2009-07-07发布 2010-01-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2318—2009 前言 本标准的附录A、附录B和附录C均为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国河北出人境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人：王凤池、郭春海、艾连峰、陈瑞春、邢军。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T 2318—2009 动物源食品中地克珠利、妥曲珠利、妥曲 珠利亚砜和妥曲珠利砜残留量的检测 高效液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了动物源食品中地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利亚砜和妥曲珠利砜残留量的高效液相色 谱-质谱/质谱检测方法。 本标准适用于鸡肉、鸡肝、鸡肾、猪肉、猪肝、猪肾、兔肉、兔肝、兔肾和鸡蛋中地克珠利、妥曲珠利、妥 曲珠利亚砜和妥曲珠利砜残留量的检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样中的地克珠利，妥曲珠利、妥曲珠利亚砜和妥要曲珠利矾残留用乙酸乙酯提取，通过凝胶渗透色 谱（GPC)净化后，用高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）测定，内标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。 行业标准信 4.1乙腈。 4.2乙酸。 4.3环已烷。 4.4乙酸乙酯。 4.5甲醇。 4.6无水硫酸钠：分析纯，经650℃灼烧4h，置于干燥器内备用。 4.7乙酸乙酯-环已烷（50+50）：相同体积的乙酸乙酯与环己烷互溶。 4.9标准品：地克珠利（CAS号：101831-37-2）、妥曲珠利（CAS号：69004-03-1）、妥曲珠利亚砜（CAS 号：69004-15-5）、妥曲珠利（CAS号：69004-04-2）和氛代妥曲珠利，纯度均大于等于98.0%。 4.10地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利亚砜和妥曲珠利砜标准储备液：分别称取每种标准品各10mg（准 确至0.1mg），用甲醇溶解，并分别定容到50ml棕色容量瓶中，混匀，该溶液的浓度为200μg/mL，可 在一18℃以下避光保存12个月， 4.11地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利亚砜和妥曲珠利砜混合标准中间液：分别取标准储备液（4.10)各 0.5mL~10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度配制成混合标准中间液，浓度为10ug/mL，可在一18℃ 以下避光保存6个月。 1 SN/T2318—2009 4.12地克珠利、妥曲珠利、妥曲珠利亚矾和妥曲珠利砜标准工作液：根据需要，吸取一定量的混合标准 中间液（4.11），用甲醇稀释至所需浓度，现用现配。 4.13内标标准储备溶液：称取氛代妥曲珠利标准品10mg（准确至0.1mg），用甲醇溶解，并分别定容 到50mL棕色容量瓶中，混匀，该溶液的浓度为200μg/mL，可在一18℃以下避光保存12个月。 4.14内标标准工作液：量取标准储备液（4.13）0.5mL10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配制成 内标工作液，浓度为10μg/mL，可在一18℃以下避光保存6个月 4.150.45um有机滤膜。 5仪器和设备 5.1高效液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI)。 5.2 凝胶渗透色谱仪：配有紫外检测器（固定波长：254nm）。 5.3涡旋振荡器。 5.4旋转蒸发器。 5.5均质器。 5.6离心机，最大转速大于等于3000r/min。 6试样制备与保存 6.1动物肌肉、肝脏和肾脏样品 从所取全部样品中取出有代表性样品可食部分约0.5kg，用组织捣碎机充分捣碎均匀，均分成两 份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于一18℃以下冷冻避光保存。 6.2禽蛋样品 从所取全部样品中取出约0.5kg，去壳，匀浆，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标 记，于一18℃以下冷冻避光保存。 7测定步骤 7.1提取 离心管中，加入50μL内标工作液（4.14），涡旋混合30s后，加人25mL乙酸乙酯和5g无水硫酸钠，以 10000r/min均质提取1min.3000r/min转速离心10min。然后禽蛋样品准确分取10mL提取液，肌 肉、肾脏、肝脏样品分取5mL提取液于15ml.的玻璃管中，45℃下氮气吹干。用乙酸乙酯-环已烷 （4.7)溶解残渣并定容至10mL，待GPC净化。 7.2净化 7.2.1凝胶渗透色谱条件 a）净化柱：22gS-X3Bio-Beads填料，200mmX20mm（内径），或相当者； b) 流动相：乙酸乙酯-环已烷（50+50，体积比），流速：5.0mL/min； c) 进样量：5mL； d）净化程序：弃去7.5mL以前的洗脱液，收集7.5min~12.5min的洗脱液 7.2.2净化过程 按上述的条件进行GPC净化。净化后将收集的洗脱液蒸干，用1mL甲醇-水（4.8）溶解残渣，涡漩 振荡，过0.45μm滤膜，供HPLC-MS/MS分析。 7.3高效液相色谱-串联质谱测定 7.3.1液相色谱条件 a）色谱柱：C18，150mmX2.1mm（内径），5μm，或相当者； 2