SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2206.2—2009 化妆品微生物检验方法 第2部分：需氧芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌 Determination of microbiological in cosmetics- Part 2:Aerobic spore-former bacteria and Bacillus cereus 行业标准信息服务平台 2009-02-20发布 2009-09-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2206.2—2009 前 言 SN/T2206《化妆品微生物检验方法》分为以下部分： 第1部分：沙门氏菌； 一第2部分：需氧芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌； 第3部分：肺炎克雷伯氏菌； 第4部分：链球菌； 第5部分：肠球菌。 本部分为SN/T2206的第2部分。 本部分的附录A和附录B均为资料性附录。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本部分起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中华人民共和国新疆出人境检验检疫局 中华人民共和国广东出人境检验检疫局。 本部分主要起草人：杨捷琳、顾鸣、韩伟、黄玲、许龙岩。 本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T2206.2—2009 化妆品微生物检验方法 第2部分：需氧芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌 1范围 芽孢杆菌的检验方法 本部分适用于化妆品中需氧芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的检验 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过SN/T2206的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用本部分，然而，鼓励根据本部分达成协 议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。 GB/T7918.1化妆品微生物标准检验方法总则 SN/T0176出口食品中蜡样芽孢杆菌检验方法 3材料和设备 3. 1 三角瓶：250ml。 3.2玻璃珠。 3.3L形玻璃棒。 3.4刻度吸管：1mL,10mL。 3.5均质器。 3.6 恒温培养箱：36℃±1℃，30℃±1℃，32℃±2.5℃。 高压灭菌器。 3.7 3.8振荡器。 4 培养基和试剂 4.1D/E中和培养基（Dey/Engley中和培养基），见附录A第A.1章。 4.3葡萄糖蛋白陈琼脂(DT培养基，加中和剂）,见附录A第A3章。 4.4API检测试纸条或其他等效产品 注：API测试条是由法国梅里埃公司提供的产品的商品名，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对 该产品的唯一认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 5检验程序 5.1化妆品中需氧芽孢杆菌检验流程图见图1。 1 SN/T 2206.2—2009 检样10g制成1:10样品稀释液 检验样品 空白对照 温度对照管 取合适浓度样品悬液，按1:10加入融化 加入等体积融化的葡萄糖蛋白膝 装有等体积蒸馏水及温度计的温度 的葡萄糖蛋白陈琼脂 琼脂 对照管 将样品及对照放入沸水浴15min 2.090.09 等量倾注5块平板 倒置30℃±1℃，培养5d 菌落确证，计数及结果报告 图1化妆品中需氧芽孢杆菌检验流程图 5.2化妆品中蜡样芽孢杆菌检验流程图见图2。 检样10g制成1:10样品稀释液 0.1mL涂布 MYP平板 葡萄糖蛋白陈琼脂平板 行业标 挑取可靛菌落，染色镜检 证实实验 计数及结果报告 图2化妆品中蜡样芽孢杆菌检验流程图 5.3样品制备 样品参照GB/T7918.1供检样品的制备方法进行。样品制备时，也可参照附录A第A.1章的 生物检验时所使用的中和剂种类和配方，可根据不同产品成分参照使用。人 5.4取1：10稀释液10.0mL加人到含有90.0mL生理盐水的稀释瓶中，置30℃1℃水浴中 15min，经常振摇，取出后静置15min，取上清液10.0mL制成1：100的稀释液，每个稀释度换用一支 10.0mL无菌吸管，按上述操作程序递增十倍稀释至合适浓度 5.5需氧芽孢菌计数 5.5.1移取合适浓度样品悬液10mL，搅拌加人融化的葡萄糖蛋白陈琼脂100mL，混合均匀，沸水浴 15min，轻微搅拌冷却至50℃～60℃，再将混合物等量倾注5块平板，待凝固后表面覆盖一薄层2%灭 菌琼脂（防止蔓延型菌落出现），待覆盖琼脂凝固后，倒置30℃士1℃，培养5d。 2