SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2012—2007 进出口食醋中苯甲酸、山梨酸的检测方法 液相色谱法 Determination of benzoic acid and sorbic acid in vinegar for export and importLiquid chromatography 行业标准信息服务平台 2007-12-24发布 2008-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T20122007 前 言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国山西出人境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人：宋欢、连庚寅、薛平、杜利君、宋洁、苑莉。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T 2012—2007 进出口食醋中苯甲酸、山梨酸的检测方法 液相色谱法 1范围 本标准规定了进出口食醋中苯甲酸、山梨酸的液相色谱检测方法。 本标准适用于食醋中苯甲酸、山梨酸的检测。 2检测方法 2.1方法提要 试样在酸性条件下蒸馏，馏出液采用液相色谱紫外检测器直接测定，外标法定量。 2.2试剂和材料 除有特殊说明以外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水， 2.2.1甲醇：高效液相色谱级。 2.2.2乙睛：高效液相色谱级。 2.2. 3 柠檬酸(C,H.O·H,O)。 2.2.4柠檬酸三钠（Na:C.H,O,·2H,O)。 2. 2. 5 柠檬酸缓冲溶液，5mmol/L：称取柠檬酸0.7g和柠檬酸三钠0.6g加水溶解定容至1000mL。 2.2. 6 酒石酸。 2.2.7 酒石酸溶液，15%：取15g酒石酸用水定容到100mL。 2.2. 8 消泡剂：硅酮树脂。 2.2. 9 碳酸氢钠。 2.2.10 20g/L碳酸氢钠溶液：称取2g碳酸氢钠，加水至100mL，振摇溶解。 2.2.11 氯化钠。 2.2.12 苯甲酸标准品：纯度大于等于99%。 2.2. 13 山梨酸标准品：纯度大于等于99% 2.2.14 苯甲酸标准储备溶液：准确称取0.1000g苯甲酸，加入5mL碳酸氢钠溶液，加热溶解，用水 定容至100mL，储备液浓度为1mg/mL。 2.2.15山梨酸标准储备溶液：准确称取0.1000g山梨酸，加人5mL碳酸氢钠溶液，加热溶解，用水 定容至100mL，储备液浓度为1mg/mL。 2.2.16苯甲酸、山梨酸标准混合液：准确移取苯甲酸、山梨酸标准储备液各10.0mL，移人100mL容 务平台 量瓶中，用水定容。此溶液苯甲酸、山梨酸的浓度均为0.1mg/ml.。 2.3仪器和设备 2.3.1高效液相色谱仪：配紫外检测器。 2.3.2蒸馏装置。 2.4测定步骤 2.4.1试样的处理 准确量取50.0mL试样，加入40g氯化钠，5mL15%酒石酸溶液，1滴消泡剂，加水至约200mL， 混匀后，进行蒸馏（蒸留速度约为2.5mL/min），收集约90mL留出液，用水定容至100mL。用 0.45μm的过滤膜过滤后，待液相色谱测定。 1 SN/T 2012—2007 2.4.2测定 2.4.2.1液相色谱条件 a) 色谱柱：Cs柱（150mmX4.6mm，5μm，或相当者）； b) 流动相：甲醇-乙睛-5mmol/L柠檬酸缓冲溶液（10：20：70体积比）； c) 流速：1.0mL/min; 检测波长：230nm； e) 柱温：30℃； f) 进样量：25μL。 2.4.2.2液相色谱测定 根据样液中苯甲酸和山梨酸的含量，选定浓度相近的标准混合工作液，保证样品溶液中苯甲酸、山 梨酸的响应值在线性范围内，标准工作液与样液等体积参差进样进行测定。在上述色谱条件下，苯甲酸 和山梨酸的参考保留时间分别约为5.13min和6.41min。苯甲酸、山梨酸标准溶液色谱图参见 附录A.1。 2.4.3空白试验 除不加试样外，均按上述步骤进行。 2.5结果计算和表述 用色谱数据处理软件外标法或按式(1)计算，计算结果需扣除空白值： AXcxVi X= (1) AsXV 式中： X- 试样中苯甲酸或山梨酸含量，单位为毫克每升（mg/L）； A- 样液中苯甲酸或山梨酸的峰面积； 标准工作液中苯甲酸或山梨酸的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； Vi 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； As 标准工作液中苯甲酸或山梨酸的峰面积； V- 试样的体积，单位为毫升（mL）。 3方法的测定低限和回收率 3.1测定低限 本方法苯甲酸和山梨酸的测定低限均为0.1mg/L。 3.2回收率 3.2. 1 食醋中苯甲酸的添加浓度及其回收率： 添加浓度在5mg/L，回收率为89.0%~99.4% 一添加浓度在50mg/L，回收率为91.2%~101.6% 3.2.2食醋中山梨酸的添加浓度及其回收率： 一添加浓度在0.1mg/L，回收率为83%~103%； 添加浓度在5mg/L，回收率为87.8%~97.0%； 一添加浓度在50mg/L，回收率为89.5%~98.2%。 2