SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1924—2011 代替SN/T1924—2007 进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴 胺、沙丁胺醇和特布他林残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of clenbuterol,ractopamine, salbutemol and terbutalin residues in foodstuffs of animal origin for import and export- HPLC-MS/MS Method 标准信息服务平台 2011-02-25发布 2011-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1924—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T1924一2007《进出口动物源食品中克伦特罗、莱可多巴胺、沙丁胺醇、特布他林 残留量的检测方法液相色谱-质谱/质谱法》。 本标准与SN/T1924一2007相比，主要技术变化如下： 适用范围增加了动物源食品牛骨汤精、牛奶及奶粉； 样品前处理中增加了正已烷脱脂步骤； 固相萃取柱由C1s和阳离子交换柱修改为混合型阳离子交换柱； 样液溶剂由乙腈十水（1十9）修改为0.1%甲酸； 克伦特罗监控离子对由277.3/203.0、277.3/259.2修改为277.0/203.0、277.0/132.0、 277.0/168.0; 经实验验证，克伦特罗测定低限由0.5μg/kg修改为0.05μg/kg。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫 局、中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：王凤美、牛增元、蔡发、邓晓军、汤志旭、张峰、张罡、罗忻、陈世山、张鸿伟、 庞士平。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T 1924—2007。 行业标准信息服务平台 I SN/T 1924—2011 进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴 胺、沙丁胺醇和特布他林残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和特布他林残留量的液相色 谱-质谱/质谱（HPLC-MS/MS）测定与确证方法。 本标准适用于进出口动物源食品肌肉、内脏、牛骨汤精以及牛奶、奶粉中克伦特罗、莱克多巴胺、沙 丁胺醇和特布他林残留量的测定及确证。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样中的克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和特布他林残留采用β-葡萄糖醛武酶/芳基硫酸酯酶酶 解，乙酸铵缓冲溶液提取，正已烷脱脂，水相溶液经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，HPLC-MS/MS 标准信 测定，内标法定量。 4试剂和材料 服务平台 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.1乙腈：色谱级。 4.2甲醇：色谱级。 4.3 正已烷：色谱级。 4.4乙酸乙酯：色谱级。 4.5 甲酸：色谱级。 4. 6 乙酸铵：色谱级。 4.7 浓盐酸：含量为36%~38%。 4.8 氨水：含量为25%~28%。 4.9β-葡萄糖醛酶/芳基硫酸酯酶溶液：含β-葡萄糖醛武酶111000U/mL;芳基硫酸酯酶1079U/mL。 4.10乙酸铵缓冲溶液（2mol/L）：称取乙酸铵（4.6）77.0g，用水稀释并定容至500mL，混匀，并用乙 酸调节pH为5.2。 4.110.1%甲酸溶液：移取1.0mL甲酸（4.5）.用水稀释并定容至1000mL，混匀。 4.120.1mol/L盐酸溶液：取9mL浓盐酸（4.7），加水稀释至1000mL，混匀。 1 SN/T 1924—2011 4.1350%甲醇溶液：50mL甲醇（4.2）与50mL水混匀。 4.14洗脱溶液：50mL乙酸乙酯（4.4）45mL甲醇（4.2）与5mL氨水（4.8）混匀。 4.15固相萃取（SPE)柱：混合型阳离子交换固相萃取柱，基质为苯磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯基苯高 聚物，60mg，3mL,或相当者。使用前依次用3mL甲醇（4.2）、3mL水和3mL盐酸溶液（4.12）对柱 子进行活化。 4.16氮气：纯度≥99.999%。 4.17标准品：盐酸克伦特罗（Clenbuterolhydrochloride），CAS编号：21898-19-1，纯度≥98.5%；盐酸 莱克多巴胺（Ractopaminehydrochloride），CAS编号：90274-24-1，纯度≥99.0%；硫酸沙丁胺醇（Salbu- salt），CAS编号：23031-32-5，纯度≥98%。 4.18标准储备液（1000mg/L）：准确称取盐酸克伦特罗、盐酸莱克多巴胺、硫酸沙丁胺醇、特布他林 半硫酸盐标准品（折合成目标化合物10.0mg），分别用适量甲醇溶解，并用甲醇定容至10mL，混匀。 一18℃以下避光保存，有效期为12个月。 4.19标准中间液：用甲醇分别稀释克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林标准储备液（4.18）至 10mg/L，4℃以下避光保存，有效期为6个月。 4.20混合标准工作液：临用前用0.1%甲酸配制，其中内标浓度分别为克伦特罗-D90.5ng/mL，莱克 多巴胺-D3、沙丁胺醇-D3均为2.5ng/mL。 4.21同位素内标物：盐酸莱克多巴胺内标物（Ractopamine-D3-HCl），纯度≥98.6%；克伦特罗内标溶 液（Clenbuterol-D9），浓度为100mg/L，溶剂为丙酮；沙丁胺醇内标溶液（Salbutamol-D3），浓度为 100mg/L，溶剂为丙酮。 4.22莱克多巴胺内标储备液（100mg/L）：准确称取盐酸莱克多巴胺-D3标准品（折合成目标化合物 10.0mg），用甲醇溶解并定容至100mL，混匀。一18℃以下避光保存，有效期为12个月。 4.23同位素内标中间液：用甲醇分别稀释克伦特罗-D9溶液（4.21）、沙丁胺醇-D3溶液（4.21)以及莱 克多巴胺-D3储备液（4.22）至10mg/L，4℃以下避光保存，有效期为6个月。 4.24同位素内标工作液：根据需要移取适量同位素内标中间液（4.23），用0.1%甲酸稀释，配制克伦 特罗-D9、莱克多巴胺-D3、沙丁胺醇-D3浓度分别为10μg/L、50ug/L、50μg/L的同位素内标工作液， 该溶液临用前配制。 5仪器与设备 5.1液相色谱-串联四极杆质谱仪：配电喷雾离子源（ESI） 5.2分析天平：感量为0.01g和0.1mg。 5.3旋涡混合器。 5.4冷冻离心机：转速≥8000r/min。 5.5固相萃取装置。 5.6组织捣碎机。 5.7均质器。 5.8氮吹浓缩仪。 6样品制备与保存 6.1制样要求 制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 2