SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1926—2007 进出口动物源食品中敌菌净残留量 检测方法 Determination of diaveridine residue in foodstuffs of animal origin for import and export 行业标准信息服务平台 2007-05-23发布 2007-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T19262007 前 言 本标准的附录A、附录B和附录C为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本标准起草单位：中华人民共和国黑龙江出人境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出人境检验检 疫局。 本标准主要起草人：杨长志、康庆贺、林维宣、刘永、王维、王宏伟。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T1926—2007 进出口动物源食品中敌菌净残留量 检测方法 1范围 本标准规定了动物源食品中敌菌净残留量的制样、高效液相色谱测定和液相色谱-质谱/质谱确证 方法。 本标准适用于禽肉及禽组织中敌菌净残留量的检测。 2样品制备与保存 从全部原始样品取出有代表性样品约500g，用组织捣碎机充分捣碎均勾，均分成两份，分别装人洁 净容器作为试样，密封，并标明标记。在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 将试样存放于一18℃冰箱中保存 3方法提要 试样中残留的敌菌净在碱性条件下用二氯甲烷提取，提取液经浓缩和酸化后，用正已烷、乙酸乙酯 和阳离子交换小柱净化。残渣用稀盐酸溶解后，用配有紫外检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定 量。必要时用液相色谱-质谱法确证，确证参见附录A和附录B。 4试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为去离子水。 4.1甲醇：液相色谱纯。 4. 2 正已烷：液相色谱纯。 4.3 二氯甲烷：液相色谱纯。 业标准信 4. 4 乙腈：液相色谱纯。 4. 5 乙酸乙酯：液相色谱纯。 4.6 氢氧化钾：优级纯。 4.7 磷酸二氢钾。 4. 8 乙酸铵。 4.9 4.10 盐酸：优级纯。 4. 11 氨水：25%~28%。 4.12 2%氨水溶液：氨水十水（2十98，体积比）。 4.134%氨水甲醇溶液：氨水+甲醇+水（4十50+46，体积比）。 4.148 8%氨水甲醇溶液：氨水+甲醇（8十92体积比）。 4.15 5盐酸溶液：0.1mol/L。取9mL盐酸溶于1000mL水中。 4.16 氢氧化钾溶液：2mol/L。取112.2g氢氧化钾溶于1000mL水中。 4.17磷酸二氢钾：0.02mol/L。取2.72g磷酸二氢钾溶于900mL水中，用磷酸调节溶液pH到3.0， 最后用水稀释到1000mL。 4.18 3敌菌净标准品：纯度≥99%。 1 SN/T 1926—2007 4.19 9敌菌净标准溶液：准确称取适量敌菌净的标准品，用乙睛配成浓度为100ug/mL的标准储备液 标准储备液可在一18℃条件下可以储存6个月；根据需要再用0.1mo1/L盐酸溶液稀释成适当浓度的 标准工作液，标准工作液可在0℃～4℃条件下储存1个月 4.20阳离子交换小柱：MCX(150mg，6mL)或相当者，预先用5mL甲醇、5mL水和5mL0.1mol/L 盐酸活化，备用。 5仪器与设备 5.1液相色谱-质谱联用仪：配电喷雾离子源（ESI）。 5.2高效液相色谱仪：配有紫外检测器。 5. 3 固相萃取装置。 5.4 组织捣碎机。 5.5 离心机。 5. 6 旋涡混合器。 5.7 旋转蒸发器。 5.8 氮吹仪。 5. 9 均质器。 5.10 具塞离心管：15mL、50mL。 5.11无水硫酸钠柱：8.0cmX1.5cm（内径）玻璃柱，内装5cm高无水硫酸钠。 5.12 2滤膜：0.45μm。 6 测定步骤 6.1提取 称取试样约5g（精确到0.01g）于50mL离心管中，加人10g无水硫酸钠、20mL二氯甲烷和 1mL2mol/L氢氧化钾溶液，用均质器以10000r/min均质2min，在4000r/min离心5min。将二氯 甲烷层通过无水硫酸钠柱脱水于250mL浓缩瓶中。再用20mL二氯甲烷重复提取一次，合并提取液 于同一250mL浓缩瓶中，在45℃水浴中用旋转蒸发器浓缩至近干，再用氮气流吹干。加入5mL正已 烷和5mL0.1mol/L盐酸溶解残渣。 6.2净化 将上述溶液转移到15ml离心管中，在旋涡混合器上快速混合2min。于4000r/min离心5min， 弃掉上层清液。再用5mL正已烷，5mL乙酸乙酯重复脱脂两次，将上层清液弃掉，下层液体经70℃氮 吹仪吹去残余的乙酸乙酯后转移至MCX阳离子交换小柱（4.20)中，控制流速在1mL/min～2mL/min，用 5mL0.1mol/L盐酸、5mL甲醇，5mL水、2mL2%氨水溶液和5mL4%氨水甲醇溶液淋洗，弃去流 出液。最后用8mL8%氨水甲醇溶液洗脱，收集洗脱液。洗脱液经70℃氮流仪吹干后用2mL 0.1mol/L盐酸溶液溶解，过0.45μm滤膜，供高效液相色谱测定。 6.3测定 6.3.1 液相色谱条件 色谱柱：InertsilODS-3，250mm×4.6mm（内径），5μm或相当者； b) 流动相：梯度洗脱程序见表1； c) 流速:1.0 mL/min; 柱温：25℃； e) 检测波长：230nm； f) 进样量：20μL。 2