SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1961.2—2007 食品中过敏原成分检测方法 第2部分：实时荧光PCR法检测花生成分 Detection of allergen components in food- Part 2: Protocol of the real-time fluorescent PCR for detecting peanut component 行业标准信息服务平台 2007-08-06发布 2008-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 食品中过敏原成分检测方法 第2部分：实时荧光PCR法检测花生成分 * 中国标准出版社出版 服务平台 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 网址 www.spc.net.cn 电话：6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880X1230 1/16 印张0.5 字数8千字 2007年11月第一版 2007年11月第一次印刷 印数1—2000 * 书号：155066·2-18243 定价6.00 元 SN/T1961.2—2007 前言 SN/T1961《食品中过敏原成分检测方法》分为两个部分： 第1部分：酶联免疫法检测花生成分； 一第2部分：实时荧光PCR法检测花生成分。 本部分为SN/T1961的第2部分。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。 本部分主要起草人：张霞、高旗利、罗茂凰、郑文杰、张海滨、张海英、黎径。 本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T1961.2—2007 食品中过敏原成分检测方法 第2部分：实时荧光PCR法检测花生成分 1范围 SN/T1961的本部分规定了食品中过敏原花生成分的实时荧光PCR检测方法。 本部分适用于检测糕点、糖果、冰淇淋等食品中过敏原花生成分，其他食品可参照使用。 2术语、定义和缩略语 2.1术语和定义 下列术语和定义适用于SN/T1961的本部分。 2. 1. 1 实时荧光PCRreal-time fluorescent,PCR 实时荧光PCR是指在PCR反应体系中加人荧光基团，利用荧光信号的积累实时监测整个PCR过 程，最后通过荧光信号的增幅进行定性分析。 2.2缩略语 下列缩略语适用于SN/T1961的本部分。 2.2.1Ct值：C：cycle，T：threshold，每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数。 2.2.2PCR：polymerasechainreaction，聚合酶链式反应，简称PCR。 2.2.3DNA：deoxyribonucleic acid,脱氧核糖核酸。 2.2.4dNTP:deoxyribonucleosidetriphosphate，脱氧核苷三磷酸。 2.2.5dATP:deoxyadenosinetriphosphate，脱氧腺苷三磷酸。 2.2.6dCTP：deoxycytidinetriphosphate，脱氧胞苷三磷酸。 2.2.7 dGTP：deoxyguanosinetriphosphate，脱氧鸟苷三磷酸。 2.2.8 dTTP：deoxythymidinetriphosphate，脱氧胸苷三磷酸。 2. 2. 9 dUTP：deoxyuridinetriphosphate，脱氧尿苷三磷酸 2.2. 10 UDG：uracilDNAglycosylase，尿嘧啶DNA-糖基化酶。 2.2.11 bp：basepair，碱基对。 2.2. 12 Taq：Thermusaquaticu，水生栖热菌。 2.2. 13 Tris：tris(hydroxymethyl）aminomethane，三（羟甲基）氨基甲烷。 2.2.14 TE:Tris-HCI、EDTA缓冲液。 3检测方法 3.1方法提要 食品经研磨后，提取DNA，以DNA为模板进行实时荧光PCR扩增，检测食品中是否存在过敏原 花生成分。 3.2试剂和材料 除另有规定外，试剂为优级纯或生化试剂，水为灭菌双蒸水。 3.2. 1 CTAB缓冲液：55mmol/LCTAB、1400mmol/L氯化钠（NaCI）、20mmol/LEDTA 100mmol/LTris，用10%盐酸（HCI)调pH至8.0,121℃，20min高压灭菌，储存于2℃~8℃备用。 1