SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1769—2006 进出口肉及肉制品中甲氧氨嘧啶 残留量测定方法 液相色谱法 Determination of trimethoprim residues in meat and meat products for import and export- Liquid chromatographic method 行业标准信息服务平台 2006-04-25发布 2006-11-15实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1769—2006 前 言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国黑龙江出人境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人：杨长志、康庆贺、马东升、张洪祥、张兰风。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 I SN/T1769—2006 进出口肉及肉制品中甲氧芒氨嘧啶 残留量测定方法液相色谱法 1范围 本标准规定了进出口肉及肉制品中甲氧苄氨嘧啶残留量检验的抽样、制样和高效液相色谱测定 方法。 本标准适用于进出口鸡肉和猪肉中甲氧苄氨嘧啶残留量的检验。 2抽样和制样 2.1检验批 以不超过2500件商品为一个检验批。 同一检验批的商品应具有相同的特征，如：包装、标记、产地、规格和等级等。 2.2抽样数量 抽样数量见表1。 表 1 单位为件 批量 最低抽样数 1~25 1 26~100 5 101~250 10 251~500 15 501~1000 17 1001~2500 20 2.3抽样方法 按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。从每件中取一袋作为原始样品，其总量不得少于 2kg。放人清洁容器内，加封后，标明标记，及时送实验室。 如每件中无小包装，或有小包装但质量超2kg者，则可用灭菌刀在抽出的包件中，每件割取不少于 100g。混合后置于清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的重量不少于2kg。加封后，标明标记， 及时送交实验室。 2.4试样制备 从所取原始样品中缩分出1kg，经捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器内作为原始样 品。密封并标明标记。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 2.5试样保存 将试样于一18℃以下冷冻保存。 3测定方法 3.1方法提要 1 SN/T1769—2006 萃取液经浓缩，残渣用流动相溶解，经三氯甲烷净化后，用配有紫外检测器的高效液相色谱仪测定，外标 法定量。 3.2试剂和材料 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为去离子水。 3.2.1甲醇：色谱纯。 3.2.2正已烷：色谱纯。 3.2.3二氯甲烷：色谱纯。 3.2.4三氯甲烷：色谱纯。 3.2.5无水硫酸钠：经650℃灼烧4h，置于干燥器内备用。 3.2.6高氯酸溶液：0.5%（体积分数）。取5mL优级纯高氯酸溶于1000mL水中。 3.2.7硫酸溶液：0.1mol/L。取5.4mL优级纯硫酸溶于1000mL水中。 3.2.8氢氧化钾溶液：2mol/L。取112.2g优级纯氢氧化钾溶于1000mL水中。 3.2. 9 甲氧芊氨嘧啶标准品：纯度≥99% 3.2.10甲氧苄氨嘧啶标准溶液：准确称取适量的甲氧氨嘧啶标准品，用甲醇配成浓度为100ug/mL 的标准储备液，根据需要再用流动相稀释成适当浓度的标准工作液。 3.3仪器和设备 3.3.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器。 3.3.2组织捣碎机。 3.3.3离心机。 3.3.4旋涡混合器。 3.3.5旋转蒸发器。 3.3.6氮吹仪。 3.3.7分液漏斗：250mL。 3.3.8具塞离心管：15mL、50mL。 3.3.9无水硫酸钠柱：8.0cmX1.5cm（内径）玻璃柱，内装5cm高无水硫酸钠。 3.3.10滤膜：0.45μm 3.4测定步骤 3.4.1提取 称取试样约5g（精确到0.1g）于50mL离心管中，加人15mL三氯甲烷和20mL甲醇 十0.1mol/L硫酸溶液（7+3）盖塞，于旋涡混合器上快速混合2min，在3000r/min离心3min。将上 清液转移到250mL分液漏斗中。再用20mL甲醇十0.1mol/L硫酸溶液（7十+3）重复提取一次。合并 提取液于同一250mL分液漏斗中。于分液漏斗中加人2mL2mol/L氢氧化钾溶液，用2×80mL二 氯甲烷充分振摇萃取2min，静置分层。将二氯甲烷层通过无水硫酸钠柱脱水于250mL浓缩瓶中，在 45℃水浴中用旋转蒸发器浓缩至近干，再用氮气流吹干。准确加人2mL流动相（3.4.3.1)溶解残渣。 3.4.2净化 将上述溶液转移到15mL离心管中，加人5mL三氯甲烷在旋涡混合器上快速混合2min。于 3.4.3测定 3.4.3.1液相色谱条件 a） 色谱柱：InertsilODS-3，250mmX4.6mm（内径），5μm或相当者； b) 流动相：甲醇+0.5%高氯酸水（30+70，V/V）； c) 流速：1.0mL/min; （P 柱温：35℃； 2