SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1865—2016 代替SN/T1865—2007 出口动物源食品中甲砜霉素、氟甲霉素 和氟苯尼考胺残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of thiamphenicol,florfenicol and florfenicol amine residues in animal-derived food for exportLC-MS/MS method 行业标准信息服务平台 2017-02-01实施 2016-06-28发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1865—2016 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T1865一2007《进出口动物源性食品中甲霉素、氟甲砜霉素残留量的检测方法 液相色谱-串联质谱法》。 本标准与SN/T1865—2007相比主要技术变化如下： 一修改了标准名称； 将“本标准适用于虾、鱼、禽肉、肠衣和蜂蜜中甲砜霉素、氟甲霉素”修改为“本标准适用于猪 肉、鸡肉、鱼、虾、猪肝、猪肾、肠衣、蜂蜜和牛奶中甲砜霉素、氟甲砜霉素和氟苯尼考胺”（见 第1章，2007年版第1章）； 一增加“规范性引用文件”（见第2章）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：浙江省检验检疫科学技术研究院、中华人民共和国上海出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：谢文、侯建波、于卓然、史颖珠、黄超群、钱艳、何建敏。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： -SN/T1865—2007。 行业标准信息服务平台 1 SN/T1865—2016 出口动物源食品中甲霉素、氟甲霉素 和氟苯尼考胺残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本标准规定了动物源性食品中甲砜霉素、氟甲砜霉素和氟苯尼考胺药物残留测定的制样和液相色 谱-质谱/质谱测定方法。 本标准适用于猪肉、鸡肉、鱼、虾、猪肝、猪肾、肠衣、蜂蜜和牛奶中甲砜霉素、氟甲砜霉素和氟苯尼考 胺残留量的检测 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法原理 样品经氨化乙酸乙酯提取，牛奶加三氯乙酸沉淀蛋白，调节溶液pH至中性后，再用氨化乙酸乙酯 提取，Ci固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量。 试剂和材料 4. 除另有说明外，所用试剂均为分析级，水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.1 乙酸乙酯。 4.2甲醇。 4.3甲酸。 4.4 三氯乙酸。 无水硫酸钠：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。 4.5 4.6 氨水：含量为25%~28%。 4.7 氢氧化钠。 4.8 氯化钠。 4.9 氨化乙酸乙酯（3+97）：量取3mL氨水和97mL乙酸乙酯，混匀。 4.10 氯化钠溶液（1.5g/L）：称取15g氯化钠，溶于水，稀释至100mL。 4.115mol/L氢氧化钠溶液：称取20g氢氧化钠，并用水稀释至100mL。 4.12 三氯乙酸溶液（1000g/L）：称取100g三氯乙酸，溶于水，稀释至100mL。 4.13 (florfenicol.Ci2HiNO,ClSF，CAS号76639-94-6），氟苯尼考胺（florfenicolamine,CiH14FNO,S 1 SN/T1865—2016 CAS号76639-93-5），纯度均大于或等于99%。 4.14标准储备溶液的配制：分别称取适量标准品（4.13）（精确至0.1mg），用甲醇溶解定容，各化合物 溶液浓度均为1mg/mL,1℃～4℃冰箱避光保存。有效期6个月。 4.15混合标准工作溶液的配制：临用前用甲醇-水（3十7)将标准储备溶液（4.14)稀释至适当浓度作为 混合标准工作液，1℃～4℃冷藏保存。 4.16无水硫酸钠柱：80mmX40mm（内径）筒形漏斗，底部垫5mm脱脂棉，再装40mm无水硫酸钠。 4.17Cis固相萃取柱：500mg，3mL或相当者，使用前依次用5mL甲醇和5mL水预洗。 4.18微孔滤膜：0.22μm，有机相。 5仪器和设备 5.1 液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2天平：感量为0.0001g和0.01g。 5.3固相萃取装置。 5.47 离心机：大于或等于3000r/min和6000r/min各一台。 5.5旋涡混合器。 5.6减压浓缩仪。 5.7具塞离心管：聚丙烯，50mL。 6试样制备与保存 6.1要求 在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生药物残留含量的变化 6.2猪肉、鸡肉、鱼、虾、猪肝和猪肾 取500g代表性样品，在室温下解冻，待样品全部融化后破碎，将试样均分成两份，分别装人样品瓶 中，密封，并标明标记。一份作为试验样，另一份在一18℃以下保存。 6.3肠衣 取300g有代表性样品，在室温下解东，待样品全部融化后用剪刀剪碎，将试样均分成两份，分别装 人样品瓶中，密封，并标明标记。一份作为试验样，另一份在一18℃以下保存。 6.4蜂蜜 蜂蜜样品：取500g代表性蜂蜜样品，未结晶的样品将其用力搅拌均匀，有结晶析出的样品可将样品瓶 盖塞紧后，置于不超过60℃的水浴中温热，等样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温。在融化时必须注意 防止水分挥发。制备好的试样均分成两份，分别装入样品瓶中，密封，并标明标记，于常温下存放 7分析步骤 7.1提取 7.1.1猪肉、鸡肉、鱼、虾、猪肝、猪肾、肠衣 称取5g试样（精确到0.01g）置于50mL具塞离心管中，加25mL氨化乙酸乙酯（4.9），涡旋1min，以 2