SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 13162011 代替SN/T1316—2003 牛海绵状脑病检疫技术规范 Quarantine protocol for bovine spongiform encephalopathy 行业标准信息服务平台 2011-05-31发布 2011-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 行业 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 牛海绵状脑病检疫技术规范 SN/T 13162011 中国标准出版社出版 邮政编码：100045 网址www.spc.net.cn 电话：6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×1230 1/16 印张2 字数57千字 2011年11月第一版 2011年11月第一次印刷 印数1—1600 * 书号：155066·2-22588 定价30.00 元 SN/T 1316—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T1316—2003《牛海绵状脑病病理组织学检查方法》。 本标准与SN/T1316一2003相比，主要的技术性变化如下： 增加了牛海绵状脑病的采样； 一增加了蛋白免疫印迹方法； 增加了酶联免疫吸附试验方法（ELISA)； 增加了免疫层析试纸条检测方法 本标准参考了国际动物卫生组织（OIE)的《诊断试验和疫苗标准手册》（2008版）《ManualofDiag nosticTestsandVaccinesforTerrestrialAnimals》)中第2.4.6章“牛海绵状脑病的诊断技术”。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国北京出人境检验检疫局起草。 本标准主要起草人：马贵平、李炎鑫、李冰玲、刘全国、史喜菊、刘旭辉。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T1316—2003。 行业标准信息服务平台 I SN/T 1316—2011 牛海绵状脑病检疫技术规范 1范围 本标准规定了牛海绵状脑病的采样、组织病理学检查方法、免疫组织化学方法、蛋白免疫印迹方法、 酶联免疫吸附试验方法、免疫层析试纸条检测方法等检测方法的技术要求和操作规范。其中组织病理 学检查方法为免疫组织化学方法的辅助方法，免疫组织化学方法和SAF蛋白免疫印迹诊断为确诊方 法，蛋白免疫印迹方法、酶联免疫吸附试验方法和免疫层析试纸条检测方法为筛选方法。 本标准适用于牛海绵状脑病的诊断，也可用于其他动物的传染性海绵状脑病的诊断。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 3临床诊断 3.1牛海绵状脑病（BSE)平均潜伏期为4年～5年。病牛临床表现为精神异常、运动障碍和感觉 障碍。 3.2精神异常：主要表现为不安、恐惧、狂暴等，当有人靠近或追逼时往往出现攻击性行为。 3.3运动障碍：主要表现为共济失调、颤抖或倒下。病牛步态呈“鹅步”状，四肢伸展过度，后肢运动失 调、震颤和跌倒、麻痹、轻滩；有时倒地难以站立。 3.4感觉障碍：最常见的是对触摸、声音和光过度敏感，这是BSE病牛很重要的临床诊断特征。用手 触摸或用钝器触压牛的颈部肋部，病牛会异常紧张颤抖，用扫帚轻碰后蹄，也会出现紧张的踢腿反应；病 牛听到敲击金属器械的声音，会出现震惊和颤抖反应；病牛在黑暗环境中，对突然打开的灯光，出现惊吓 准信息服务平台 和颤抖反应。 4实验室诊断 4.1采样及样品准备方法 4.1.1材料 4.1.1.1被检组织 待检牛脑。 4.1.1.2试剂 10%中性福尔马林溶液（见附录A）；消毒液：2%次氯酸钠，2mol/L氢氧化钠；98%~99%甲酸；无 水乙醇；95%乙醇溶液；70%乙醇溶液；二甲苯；石蜡（熔点为54℃~56℃，56℃~58℃，58℃~60℃）。 1