SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1202—2010 代替SN/T1202—2003 食品中转基因植物成分定性 PCR检测方法 Protocol of the qualitative polymerase chain reaction for detecting genetically modified plant components in food 行业标准信息服务平台 2010-11-01发布 2011-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1202—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T1202一2003《食品中转基因植物成分定性PCR检测方法》。 本标准与SN/T1202一2003相比，主要技术变化如下： 规范了专业用语和表述方式； 调整了标准的适用范围（2003年版的第1章；本版的第1章），删除了以菜籽油和棉籽油为原 料的食品，删除了食品添加剂，增加了以水稻、小麦为原料的食品； 调整了规范性引用文件（2003年版的第2章；本版的第2章），采用了GB/T19495系列标准； -对待检样品的制备（2003年版的6.4.1；本版的6.4.1)的表述方式重新编排，增加了特定类型 样品的前处理方法； 6.4.2.1)采用GB/T19495.3中规定的方法； 一对食品中核酸的定量（2003年版的6.4.3；本版的6.4.3）采用GB/T19495.3中规定的方法； 版的6.5)相应增加了实时荧光PCR检测结果判断方法； 6.3.20、6.4.4.1、6.5.1、表1、表3和表4)的表述方式重新编排，修改了反应体系，增加了引物 序列，并修改了确证实验方法。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国广东出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：高东微、李丹宇、陈永红、钟玉清、张隽、董洁、徐宝梁、陈源树、谢佩心。 示准信息服务平台 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T 12022003。 I SN/T 1202—2010 食品中转基因植物成分定性 PCR检测方法 1范围 本标准规定了食品中转基因植物成分的定性PCR检测方法。 本标准适用于以大豆、玉米、番茄、马铃薯、水稻、小麦等农产品及其加工产品为原料生产的食品半 成品和成品中转基因大豆（RoundupReady）、玉米（176、Bt11、Mon810、T14/T25、GA21、CBH351）、番 茄（1345-4、351N、5345、8338、FLAVRSAVR、BioScien、8805R、Zeneca?）、马铃薯（NewLeaf?Y、 NewLeaf?Plus、NewLeaf?）、水稻（Bt63）、小麦成分的定性PCR检测。本标准适用的食品半成品和成 品不包括调味品和食用油脂 本标准能够检测出以大豆、玉米、番茄、马铃薯、水稻、小麦为主要原料生产的食品中0.1%转基因 成分。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求 GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法 GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法 GB/T27025检测和校准实验室能力的通用要求 SN/T1204植物及其加工产品中转基因成分实时荧光PCR定性检验方法 3缩略语 下列缩略语适用于本文件。 BAR（phosphinothricinacetyltransferasegenefromBacillusamyloliquefaciens）：淀粉液化芽孢杆 菌草丁麟乙酰转移酶基因 bp（basepair）：碱基对 Btc（theconstructspecificDNAsequenceoftransgenicriceeventBt63）：转基因水稻品系Bt63结 构特异性基因序列 CaMV35S（35Spromoterfromcauliflowermosaicvirus）：花椰菜花叶病毒35S启动子 CTAB（hexadecyltrimethylammoniumbromide）：十六烷基三甲基溴化铵 CrylA(b)(the crylAbl gene encoding an insecticidal crystal protein from Bacillus thuringiensis): 编码苏云金杆菌杀虫结晶蛋白的crylAbl基因，又称CryIA（b)基因 CrylA(b/c)[a synthetic gene encoding the insecticidal crystal protein through the fusion of CrylA （b）geneandCrylA（c）genefromBacillusthuringiensisl：编码苏云金杆菌杀虫结晶蛋白的CrylA（b） 和CryIA（c）融合基因 1 SN/T1202—2010 CrylA(c)(the crylAcl gene encoding an insecticidal crystal protein from Bacillus thuringiensis): 编码苏云金杆菌杀虫结晶蛋白的crylAcl基因，又称CryIA（c)基因 Cryll A(the cry3Aal gene encoding an insecticidal crystal protein from Bacillus thuringiensis):编 码苏云金杆菌杀虫结晶蛋白的cry3Aal基因，又称CryⅢA基因 EDTA(ethylenediaminetetraacetic acid)：乙二胺四乙酸 FAM（6-carboxyfluorescein）：6-羧基荧光素 FMV35S(35Spromoterfromamodifiedfigwortmosaicvirus）：经修饰的玄参花叶病毒35S启 动子 GOS(a root-specific rice gene highly expressed in roots from seedlings and mature plants which encodesa14kDaprotein）：编码一个14kDa蛋白质、在幼苗和成熟植株根部高度表达的水稻种属特异性 基因 HEX（5-hexachloro-fluorescein）：5-六氯荧光素 Lectin：植物凝集素基因 LA（linearacrylamide）：线状丙烯酰胺 NOS（terminatorofnopalinesynthasegene）：胭脂碱合酶基因终止子 NPT II (neomycin phosphotransferase II gene or aminoglycoside-3'-phosphotransferase II gene): 新霉素磷酸转移酶基因，也称氨基糖苷-3'-磷酸转移酶基因 PAT（phosphinothricinacetyltransferasegene）：草丁麟乙酰转移酶基因 Patatin(the gene encoding an approximately 4o-kDa glycoprotein which constitutes up to 4o% of 贮藏蛋白40% PG（polygalacturonasegene）：多聚半乳糖醛酸酶基因 PLD(ricespecificphospholipaseDgene）：水稻特异性磷脂酶D基因 SPS（ricespecific sucrosephosphatesynthasegene）：水稻特异性蔗糖磷酸合酶基因 PVY-cp(potatoYviruscoatproteingene）：马铃薯Y病毒外壳蛋白基因 ROX(carboxy-X-rhodamine）：羧基-X-罗丹明 Taq（Thermusaquaticu）：水生栖热菌 TAMRA（carboxy-tetramethyl-rhodamine）：羧基四甲基罗丹明 息服务平台 TE:Tris-HCI、EDTA缓冲液 tRNALeu：叶绿体亮氨酸转运核糖核酸基因 Tris[tris（hydroxymethyl)aminomethane]：三（羟甲基）氨基甲烷 UNG酶（Uracil-N-glycosylase）：尿嘧啶DNA-糖基化酶 ZEIN：玉米醇溶蛋白基因。 4F 防止污染措施 防止污染措施应符合GB/T19495.2的规定。 5抽样与制样 抽样与制样方法应符合GB/T19495.7和GB/T19495.3中的相关规定。 2