ICS 67.100.10 X 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3513—2019 离子色谱法 生乳中硫氰酸根的测定 Determination of thiocyanate in raw milk-Ion chromatography 行业标准信息服务平台 2020-04-01实施 2019-12-27发布 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T3513—2019 前 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出。 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会（SAC/TC274）归口。 本标准起草单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、农业农村部奶产品质量安全风险评估实验室 （北京）、农业农村部奶及奶制品质量监督检验测试中心（北京）。 本标准主要起草人：文芳、叶巧燕、郑楠、李松励、王加启。 行业标准信息服务平台 1 NY/T 3513—2019 生乳中硫氰酸根的测定 离子色谱法 1范围 本标准规定了生乳中硫氰酸根测定的离子色谱法 本标准适用于牛、羊、水牛、耗牛等不同奶畜生乳中硫氰酸根的测定。 本标准的检出限为0.25mg/kg，定量限为0.75mg/kg 2规范性引用文件 GB/T 6682 2分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样用乙腊沉淀蛋凸 离天色 液加水调 并经反相固相萃取柱净化后 谱分离，电导检测器检 测。以保留时间定性，外象 定量 AL 4试剂或材料 用分析纯试剂。 6682 4.1 水,GB/ 4. 2 2乙睛（CHCN色谱纯 4.3甲醇(CH H) 4.4丙酮（C.O 4.550%氢氧化 4.6离子色谱淋洗夜根据仪 及色谱柱选择和配制不问的淋洗液体 4.6.1氢氧根系淋洗液仪 片 4.6.1.1氢氧化钾淋 先液山淋道 电解发生器在线生成·浓度为45 60 mmol/L。 4.6.1.2氢氧化钠淋洗液（45mmol 纳溶液（4 用水稀释至1000mL，可 通人氮气保护，以减缓碱性淋洗液吸收空 缓慢摇匀，室温下可放置7d。 4.6.1.3氢氧化钠淋洗液（60 /L):取3.1 mL50%氢氧化钠浴 夜（4.5），用水稀释至1000mL，可 通人氮气保护，以减缓碱性淋洗液吸收 的cO，而失效，缓习，室温下可放置7d。 4.6.2碳酸盐系淋洗液（Na?CO3浓度为5mmol） NaHCO浓度为2mmol/L，丙酮浓度为5%）：准确 称取0.5300g碳酸钠和0.1680g碳酸氢钠，分别溶于适量水中，转移至1000mL容量瓶，加人50mL 丙酮，用水稀释定容，混匀。 4.7硫酸溶液（45mmol/L）：移取2.45mL浓硫酸，加人适量水中，并用水定容至1000mL，混匀。 4.8硫氰酸根标准储备溶液（1000mg/L）：将硫氰酸钠（NaSCNCAS号：540-72-7，纯度≥99.99%）于 80℃烘箱内烘干2h。准确称取干燥后的硫氰酸钠0.1397g，用水定容至100mL，混匀。0℃～4℃保存， 有效期为6个月。 4.9硫氰酸根标准中间溶液（10mg/L）：准确吸取1mL硫氰酸根标准储备液（4.8），用水稀释至100 mL，混匀。0℃～4℃保存，有效期为1个月。 4.10硫氰酸根标准系列溶液：分别准确移取硫氰酸根标准中间溶液（4.9)0μL、10μL、20μL、50μL、 1 NY/T3513—2019 100μL、500μL和1000μL,用水定容至10mL,混匀，得到浓度分别为0mg/L、0.01mg/L、0.02mg/L、0.05 mg/L、0.10mg/L、0.50mg/L和1.00mg/L的硫酸根标准工作液。0℃～4℃保存，有效期为1个月。 5仪器设备 5.1离子色谱仪：配抑制器电导检测器。 5.2高速冷冻离心机：8000r/min，4℃。 5.3天平：感量为0.1mg、0.01g。 5.4涡旋混匀器。 5.5移液器：100μL、1mL。 5.6烘箱：（80±5)℃。 5.7过滤器：水系，0.22μm。 5.8反相净化小柱，如OnGuardIIRP柱"(1.0mL),或性能相当者。 6样品 采集的有代表性生乳样品可用硬质玻璃瓶或聚乙烯瓶盛放，样品采集后应尽快分析。若样品 过30d，解冻温度不应超过60℃，解冻次数不应超过5次。冷藏、冷冻的样品需恢复至室温并摇匀，待测。 7试验步骤 7.1试样处理 称取试样4g（精确至0.01g），用乙定容至10mL，混匀1min，静置20min，离心5min。准确移取 1.00mL上清液用水定容至10mL并混匀，备用。同时做空白试验。 7.2提取液净化 将反相净化小柱依次用5mL甲醇和10mL水活化，静置30min，取上述溶液（7.1)，过0.22μm滤 膜并加载到活化好的净化反相柱上，弃去前3mL流出液，收集滤液，待测。 7.3仪器参考条件 7.3.1仪器参考条件I 7.3.1.1色谱柱：以OH-为流动相，并能使用梯度洗脱的、高容量的阴离子交换柱，如IonPacAS-16 型色谱柱（4mm×250mm）和IonPacAG-16型保护柱2）（4mmX50mm），或性能相当的离子色谱柱。 7.3.1.2抑制器：ASRS-3004mm阴离子抑制器3），或性能相当的抑制器；外加水抑制模式，抑制器电流 为112mA~149mA，外加水流量1.2mL/min。 7.3.1.3淋洗液：氢氧根系淋洗液（4.6.1)，流速为1.0mL/min，梯度淋洗。梯度淋洗条件参见表1。 表1离子色谱仪淋洗液梯度淋洗条件（氢氧根体系） 序号 时间，min 流速，mL/min OH-浓度，mmol/L 1 0.0~13.0 1. 00 45.0 2 13.1~18.0 1. 00 60.0 3 18. 1~23. 0 1. 00 45.0 1）OnGuardIRP柱是商品名，此处列出仅供参考，并不涉及商业目的。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产 品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。 2)1 IonPacAS-16型色谱柱和lonPacAG-16型保护柱是商品名，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。 如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。 3) ASRS-3004mm阴离子抑制器是商品名，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产 品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。 2