ICS 65.120 B 46 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3477—2019 饲料原料 酿酒酵母细胞壁 Feed materialYeast cell wall from Saccharomyces cerevisiae 行业标准信息服务平台 2019-08-01发布 2019-11-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 品标准 NY/T 3477—2019 前 言 X 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起章。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）归口。 本标准起草单位：安琪酵母股份有限公司。 本标准起草人：陈蓉、胡骏鹏、罗必英、邓娟娟、曾雨雷、 行业标准信息服务平台 1 NY/T 3477—2019 饲料原料 酿酒酵母细胞壁 1范围 本标准规定了饲料原料酿酒酵母细胞壁的技术要求、取样、试验方法、检验规则、标签、包装、运输、储存 本标准适用于酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae）经液体发酵后得到的菌体，再经自溶或外源酶催 化水解，分离获得的细胞壁经浓缩、干燥得到的产品。 2 规范性引用文件 GB/T6432饲料中粗蛋白的测定 GB/T6435—2014 饲料中水分的测 饲料中粗灰分的测定 GB/T 6438 GB/T 6682 GB/T 8170 GB 10648 饲料标签 卫平标准 GB 13078 饲料 饲科 GB/T14699. 采样 同料检测结果判定的允许误差 GB/T1882 3技术要求 3.1外观与性状 浅黄色至深灰色的均习来 粉木，具有酿酒酵母特有的气味 无异味，无结块 少砾等异物。 3.2理化指标 R 应符合表1的要 表 理化指标 单位为百分率 项 指 β-葡聚糖 18.0 甘露聚糖 ≥18.0 水分 0'8> 粗灰分 0.97 粗蛋白质 ≤40.0 3.3卫生指标 应符合GB13078的要求。 4取样 按GB/T14699.1的规定执行。 5试验方法 5.1外观与性状 取适量试样置于玻璃烧杯内，在自然光下观察其色泽、形态、有无杂质，嗅其气味。 NY/T 3477—2019 5.2β葡聚糖和甘露聚糖 5.2.1原理 根据葡萄糖和甘露糖在流动相和液相色谱柱的固定相之间具有不同的分配系数，将水解后的试样注 人液相色谱，用稀硫酸作流动相，糖类分子流出后，经示差检测器检测，用外标法定量。 5.2.2试剂或材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯以上的试剂，水为GB/T6682中的一级水。 5.2.2.1盐酸：36%~38%。 5.2.2.2氢氧化钠溶液（300g/L)：称取氢氧化钠300.0g，用水溶解定容至1000mL。 5.2.2.3氢氧化钠溶液（40g/L）：称取氢氧化钠40.0g，用水溶解定容至1000mL。 5.2.2.4葡萄糖和甘露糖混合标液（2g/L）：分别称取经过98℃100℃干燥2h的无水葡萄糖（纯度 5.2.3仪器设备 5.2.3.1水浴锅。 5.2.3.2涡旋混合器。 5.2.3.3压力蒸汽灭菌锅。 5.2.3.4分析天平（精度：0.0001g）。 5.2.3.5恒温干燥箱。 5.2.3.6高效液相色谱仪（带示差折光检测器）。 5.2.3.7水解瓶：耐高温带盖玻璃瓶，250mL。 5.2.4试验步骤 5.2.4.1样品水解 准确称取400mg（精确至0.1mg）试样于20mL具塞玻璃管中，准确加入6mL盐酸（5.2.2.1)，将 玻璃管塞紧后用涡旋混合器混合，得到均一的悬浮液。将其放人30℃水浴中恒温45min，每15min用涡 旋混合器振荡混合一次。然后将悬浮物转移到250mL水解瓶中，用100mL～120mL的水，分多次洗涤 20mL具塞玻璃管，洗涤液并人水解瓶中。将水解瓶放人压力蒸汽灭菌锅，在温度升高到121℃后继续处 理60min。在压力蒸汽灭菌锅温度降到100℃以下后，取出冷却至室温，加人9mL300g/L的氢氧化钠 定容至刻度。使用0.45μm孔径的乙酸纤维素膜过滤备用。 5.2.4.2色谱条件 色谱柱:AminexHPX-87HionExclusion(7.8mmX300mmBIO-RAD1))。 流动相：0.005mol/L硫酸溶液。用1mL刻度吸管吸取0.55mL浓硫酸至5L的烧杯中，加人2L 息服务平 的水，搅拌均匀。 流速：0.6mL/min。 柱温：65℃。 进样量：20μL。 5.2.4.3标准曲线的绘制 分别吸取葡萄糖和甘露糖混合标液（5.2.2.4）1mL、2mL、3mL、4mL、5mL到10mL容量瓶中， 用水定容到刻度，得到葡萄糖、甘露糖各为200mg/L、400mg/L、600mg/L、800mg/L、1000mg/L的混 合标样。在上述色谱条件下准确进样20μL，得到色谱峰面积和标准物质量浓度之间的回归方程，绘制标 准曲线。 1）BIO-RAD为BIO-RADLaboratonies,inc公司产品的商品名。给出这一信息是为方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认 可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可以使用这些等效的产品。 2