ICS 65.020.30 B 43 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3444—2019 耗牛冷冻精液生产技术规程 Technical code of pratice for yak frozen semen producing 行业标准信息服务平台 2019-08-01发布 2019-11-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T 3444—2019 前 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出。 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会（SAC/T274)归口。 本标准起草单位：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所、青海省家畜改良中心、青海省大通种牛场。 本标准主要起草人：阎萍、郭宪、王宏博、冯宇诚、梁春年、马进寿、丁学智、包鹏甲、裴杰、褚敏、吴晓云、 薛晓蓉、刘更寿、张国模、王伟、骆正杰、赵寿保、殷满财、李吉叶。 行业标准信息服务平台 NY/T3444—2019 耗牛冷冻精液生产技术规程 1范围 本标准确定了耗牛冷冻精液生产流程，规定了耗牛冷冻精液生产的器具清洗和消毒、精液采集、精液 处理、精液冷冻。 本标准适用于耗牛冷冻精液生产。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB4143牛冷冻精液 GB/T5458液氮生物容器 GB/T30396牛冷冻精液包装、标签、储存和运输 NY/T1234牛冷冻精液生产技术规程 3冷冻精液生产流程 冷冻精液生产过程包括器具清洗和消毒、精液采集、精液处理、精液冷冻，生产流程见图1。 器具消洗和消毒上 精液采集精液处理上精液冷冻 图1冷冻精液生产流程 4器具清洗和消毒 4.2玻璃器ⅢL应在热水中加洗涤剂刷洗，再用自来水冲洗，也可用超声波清洗仪清洗，然后放入恒温鼓风 干燥箱中160℃恒温90min~120min灭菌。 4.3常用金属器械应使用75%酒精棉球擦拭消毒。冻精细管及纱布袋应使用紫外线消毒。 5精液采集 5.1场地 采精场地应宽、平坦、安静、清洁，铺有防滑设施，设有采精架。 5.2种公牛 经过调教且年龄4岁以上，等级评价为特级或一级，无遗传疾病，体质健康。 5.3季节 采精季节一般为7月～10月。 5.4采精器安装 采精器内胎及三角漏斗用75%的酒精棉球消毒，然后将三角漏斗安装于采精器上，接上集精管，套上 保护套。采精器内可提前注入38℃左右温水，并用消毒纱布包裹好采精器口，放置于预先调整好温度为 44℃～46℃的恒温箱内待用。采精前，在采精器内胎的前2/3处用涂抹棒均匀涂擦适量消毒过的润滑剂 （凡士林与液体石蜡1：1混合均匀），并从活塞孔打气，使采精器有适度（采精器口呈三角形状为宜)的压 力。采精时温度控制在38℃～42℃。 NY/T 3444—2019 5.5公牛的性准备 通过观察其他采精公牛，嗅闻发情母牛或在台牛部涂抹发情母牛的黏液，让公牛进行空爬，利用视 觉和膜觉，诱导公牛性兴奋，待公牛性欲旺盛时采精。 5.6采精方法 采精员右手持采精器，站在公耗牛右后侧。当公牛跳起、前肢爬上台牛后背上时，迅速向前用左手托 着公牛包皮，右手持采精器与台牛呈40°角，采精器口斜向下方，左右手配合将公牛阴茎自然地引人采精 器口内，公牛往前一冲即完成射精动作。公牛随即而下，采精员右手紧握采精器，随公牛阴茎而下。待公 牛前肢落地时，顺势把采精器脱出，并立即将采精器口斜向上方。打开活塞放气，使精液尽快地流入集精 杯内，然后取下集精杯，迅速送至精液处理室 5.7采精频率 每周可采精2次～3次，间隔不少于1d。 PUBLI 6精液处理 6.1鲜精检测 34的规定执行 6.2鲜精质量要求 外观色泽乳白色或淡食色 精子活力人于 密度人等于6 S SEARC 6.3精液稀释 6.3.1稀释液配制 6.3.2稀释方法 R 一次稀释 先按等量顶稀释，10min后按精子密度仪测算的稀释量加人 两次稀释 等B2℃ 加人第 精液量）/2]一精液量，然后第二液同时放人3 夜，所加第二液 的量一（所加稀释液） 总量 所加第液的量 6.3.3降温和平衡 将稀释后的精液放置 低温柜重平衡3h 6.4分装和标识 细管冷冻精液剂型为微型。 T1234的规定执行。 大 标识应在细管壁上清楚标记生产单位品种 日期或批次：种公牛的品种代号具体见附录B。 7精液冷冻 7.1上架 平衡、封装后的细管精液，上架码放和冷冻时应把棉塞封口端朝内，超声波封口端朝外。 7.2冷冻 精液在低温容器中，按预先设定好的程序自动完成冷冻过程。冷冻完成后，打开冷冻容器盖子，细管 冻精按照牛号收集放入不同的盛满液氮的专用容器里，放人时将细管棉塞端朝下，超声波封口端朝上，并 迅速浸泡在液氮中。 7.3冷冻精液质量评定 7.3.1精液解冻 将细管冻精直接置于（38士1)℃水浴解冻，解冻时间10s~15s。 7.3.2质量评定 检测方法按照GB4143的规定执行。冷冻精液细管无裂痕，两端封口严密。每剂量解冻后精子活力 2