HJ634—2012 土囊、氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定 氯化钾溶液提取-分光光度法 1适用范围 本标准规定了测定土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的氯化钾溶液提取-分光光度法 本标准适用于土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定。 当样品量为40.0g时，本方法测定土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的检出限分别为0.10mg/kg、 0.15mg/kg、0.25mg/kg，测定下限分别0.40mg/kg、0.60mg/kg、1.00mg/kg。 2规范性引用文件 本标准内容引用了下列文件中的条款。凡是未注明日期的引用文件，其有效版本适用于本标准 HJ168环境监测分析方法标准制修订技术导则 HJ613土壤干物质和水分的测定重量法 HJ/T166土壤环境监测技术规范 ISO/TS14256-1土壤质量硝酸盐氮、亚硝酸盐氮、氨氮的测定氯化钾溶液提取法（Soil quality-Determination of nitrate, nitrite and ammonium in field-moist soils by extraction with potassium chloridesolution) 3方法原理 3.1氨氮 氯化钾溶液提取土壤中的氨氮，在碱性条件下，提取液中的氨离子在有次氯酸根离子存在时与苯酚 反应生成蓝色靛酚染料，在波长630nm处具有最大吸收。在一定浓度范围内，氨氮浓度与吸光度值符 合朗伯-比尔定律。 3.2亚硝酸盐氮 氯化钾溶液提取土壤中的亚硝酸盐氮，在酸性条件下，提取液中的亚硝酸盐氮与磺胺反应生成重氮 盐，再与盐酸N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料，在波长543nm处具有最大吸收。在一定浓度范 围内，亚硝酸盐氮浓度与吸光度值符合朗伯-比尔定律。 3.3硝酸盐氮 氯化钾溶液提取土壤中的硝酸盐氮和亚硝酸盐氮，提取液通过还原柱，将硝酸盐氮还原为亚硝酸盐 氮，在酸性条件下，亚硝酸盐氮与磺胺反应生成重氮盐，再与盐酸N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色 染料，在波长543nm处具有最大吸收，测定硝酸盐氮和亚硝酸盐氮总量。硝酸盐氮和亚硝酸盐氮总量 与亚硝酸盐氮含量之差即为硝酸盐氮含量。 1 HJ 634—2012 4试剂和材料 除非另有注明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为电导率小于0.2mS/m（25℃ 时测定）的去离子水。 4.1氨氮 4.1.1 浓硫酸：p(H2SO4)=1.84g/ml。 4.1.2二水柠檬酸钠（C6HsNa3O72H20)。 4.1.3氢氧化钠（NaOH)。 4.1.4二氯异氰尿酸钠（C3Cl2N3NaO3·H2O） 4.1.5氯化钾（KCI)：优级纯。 4.1.6氯化铵（NH4CI)：优级纯。 于105℃下烘干2h。 4.1.7氯化钾溶液：c(KCl)=1mol/L。 称取74.55g氯化钾（4.1.5），用适量水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混匀。 4.1.8氯化铵标准贮备液：P(NH4Cl)=200mg/L。 称取0.764g氯化铵（4.1.6），用适量水溶解，加入0.30ml浓硫酸（4.1.1），冷却后，移入1000ml 容量瓶中，用水定容，混匀。该溶液在避光、4℃下可保存一个月。或直接购买市售有证标准溶液。 4.1.9氯化铵标准使用液：p(NH4Cl)=10.0mg/L。 量取5.0ml氯化铵标准贮备液（4.1.8）于100ml容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。 4.1.10苯酚溶液。 称取70g苯酚（CsH5OH）溶于1000ml水中。该溶液贮存于棕色玻璃瓶中，在室温条件下可保存 一年。 注：配制苯酚溶液时应避免接触皮肤和衣物。 4.1.11二水硝普酸钠溶液。 称取0.8g二水硝普酸钠[Na2[Fe(CN)sNO]·2H2O]溶于1000ml水中。该溶液贮存于棕色玻璃瓶中, 在室温条件下可保存三个月。 4.1.12缓冲溶液。 称取280g二水柠檬酸钠（4.1.2）及22.0g氢氧化钠（4.1.3），溶于500ml水中，移入1000ml容 量瓶中，用水定容，混匀。 4.1.13硝普酸钠-苯酚显色剂。 时现配。 4.1.14二氯异氰尿酸钠显色剂。 称取5.0g二氯异氰尿酸钠（4.1.4）溶于1000ml缓冲溶液（4.1.12）中，4℃下可保存一个月。 4.2亚硝酸盐氮 4.2.1浓磷酸：p(H3PO4)=1.71g/ml。 4.2.2氯化钾（KCI)：优级纯。 4.2.3亚硝酸钠（NaNO2)：优级纯。 干燥器中干燥24h。 4.2.4氯化钾溶液：c(KCl)=1mol/L。 2 HJ634—2012 同4.1.7。 4.2.5亚硝酸盐氮标准贮备液：p(NO2-N)=1000mg/L。 称取4.926g亚硝酸钠（4.2.3），用适量水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混匀。该溶 液贮存于聚乙烯塑料瓶中，4℃下可保存六个月。或直接购买市售有证标准溶液。 4.2.6亚硝酸盐氮标准使用液I：p(NO2-N)=100mg/L。 量取10.0ml亚硝酸盐氮标准贮备液（4.2.5）于100ml容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。 4.2.7亚硝酸盐氮标准使用液II：p(NO2-N)=10.0mg/L。 量取10.0ml亚硝酸盐氮标准使用液1（4.2.6）于100ml容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。 4.2.8磺胺溶液（C6HgN2O2S）。 容，混匀。该溶液于4℃下可保存一年。 4.2.9盐酸N-（1-萘基）-乙二胺溶液。 称取0.40g盐酸N-（1-基）-乙二胺（C12H14N2·2HCI）溶于100ml水中。4℃下保存，当溶液 颜色变深时应停止使用。 4.2.10显色剂。 分别量取20ml磺胺溶液（4.2.8）、20ml盐酸N-（1-基）-乙二胺溶液（4.2.9）、20ml浓磷酸 （4.2.1）于100ml棕色试剂瓶中，混合。4℃下保存，当溶液变黑时应停止使用。 4.3硝酸盐氮 4.3.1浓磷酸：p(H3PO4)=1.71g/ml。 4.3.2浓盐酸：p(HCI)=1.12g/ml。 4.3.3镉粉：粒径0.3~0.8mm。 4.3.4氯化钾（KCI)：优级纯。 4.3.5硝酸钠（NaNO3)：优级纯。 干燥器中干燥24h。 4.3.6亚硝酸钠（NaNO2)：优级纯。 同4.2.3。 4.3.7氯化铵（NH4CI)。M 4.3.8硫酸铜（CuSO4·5H2O）。 4.3.9氨水（NH4OH)：优级纯。 4.3.10氯化钾溶液：c(KCl)=1mol/L。 同4.1.7。 4.3.11硝酸盐氮标准贮备液：p(NO3-N)=1000mg/L。 称取6.068g硝酸钠（4.3.5），用适量水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混匀。该溶液 贮存于聚乙烯塑料瓶中，4℃下可保存六个月。或直接购买市售有证标准溶液。 4.3.12硝酸盐氮标准使用液I：P(NO3-N)=100mg/L。 量取10.0ml硝酸盐氮标准贮备液（4.3.11）于100ml容量瓶中，用水定容，混勺。用时现配。 4.3.13硝酸盐氮标准使用液II：p(NO3-N)=10.0mg/L。 量取10.0ml硝酸盐氮标准使用液1（4.3.12）于100ml容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。 4.3.14硝酸盐氮标准使用液III：p(NO3-N)=6.0mg/L。 量取6.0ml标准使用液I（4.3.12）于100ml容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。 4.3.15亚硝酸盐氮标准备液：p(NO2-N)=1000mg/L。 同4.2.5。 3 HJ634—2012 4.3.16亚硝酸盐氮标准中间液：p(NO2-N)=100mg/L。 同4.2.6。 4.3.17亚硝酸盐氮标准使用液III：p(NO2-N)=6.0mg/L。 量取6.0ml亚硝酸盐氮标准中间液（4.3.16）于100ml容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。 4.3.18氨水溶液：（1+3）。 4.3.19氯化铵缓冲溶液贮备液：p(NH4CI)=100g/L。 将100g氯化铵（4.3.7）溶于1000ml容量瓶中，加入约800ml水，用氨水溶液（4.3.18）调节pH 值为8.7～8.8，用水定容，混匀。 4.3.20氯化铵缓冲溶液使用液：p(NH4CI)=10g/L。 量取100ml氯化铵缓冲溶液贮备液（4.3.19）于1000ml容量瓶中，用水定容，混匀。 4.3.21磺胺溶液。 同4.2.8。 4.3.22盐酸N-（1-萘基）-乙二胺溶液。 同4.2.9。 4.3.23显色剂。 同4.2.10。 5仪器和设备 5.1 分光光度计：具10mm比色皿。 5.2pH计：配有玻璃电极和参比电极。 5.3恒温水浴振荡器：振荡频率可达40次/min。 5.4还原柱：用于将硝酸盐氮还原为亚硝酸盐氮，具体制备方法见附录C。 5.5离心机：转速可达3000r/min，具100ml聚乙烯离心管。 5.6天平：精度为0.001g。 5.7聚乙烯瓶：500ml，具螺旋盖。或采用既不吸收也不向溶液中释放所测组分的其他容器。 5.8具塞比色管：20ml、50ml、100ml。 5.9样品筛：5mm。 标准信息服务平 5.10 一般实验室常用仪器和设备。 6样品 6.1样品的采集 按照HJ/T166的相关规定采集样品。 6.2样品的保存 样品采集后应于4℃下运输和保存，并在3日内分析完毕。否则，应于-20℃（深度冷冻）下保存， 样品中硝酸盐氮和氨氮可以保存数周。 当测定深度冷冻的硝酸盐氮和氨氮含量时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻、匀