ICS.11. 220 B 41 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 554--2002 鸭病毒性肝炎诊断技术 Diagnostic techniques for duck viral hepatitis 行业标准信息服务平 2002-08-27 发布 2002-12-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T 554-2002 言 前 鸭病毒性肝炎(duck viral hepatitis,简称DVH)是维鸭的一种急性接触传染性疾病,以肝炎为主要 特征，世界动物卫生组织[World Organization for Animal Health(英),Office Intentional des Epizootic （法）,OIE］把该病列为B类疫病，我国农业部列为二类疫病。DVH的病原为鸭肝炎病毒（DHV）,根据 病毒的特性不同,DHV分为3种类型(DHV/、DHV、DHV,）。最常见的为DHV，属肠道病毒（我国仅 有此型);DHV,为星状病毒;DHV,为小核糖核酸病毒。 本标准规定的维鸭接种/保护试验和鸭（鸡）胚接种/中和试验与OIE推荐的相应方法一致。 本标准由农业部畜牧兽医局提出。 本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：华南农业大学、江苏省农业科学院。 本标准主要起草人：贺东生、黄引贤、张则斌、罗函禄、刘福安。 行业标准信息服务平 NY/T 554—2002 鸭病毒性肝炎诊断技术 1范围 本标准规定了鸭病毒性肝炎的维鸭接种/保护试验和鸭（鸡）胚接种/中和试验的技术要求。 本标准适用于鸭病毒性肝炎的诊断及检疫。 2雏鸭接种/保护试验 2.1材料准备 2.1.1研钵或平血，玻璃匀浆器，10mL带胶塞玻璃瓶。 2.1.21mL和5mL注射器及针头。 2.1.30.22μm微孔滤膜及滤头。 2.1.4离心管、手术剪刀和手术镊子。 2.1.50.85%生理盐水：在使用前加人青霉素和链霉素，使其最终浓度分别为2000IU/mL和2000 μg/mL。 2.1.6DHV高免血清（在国内诊断检疫仅用DHV，，对进境鸭的检疫还应加上DHV.、DHV,抗血清）。 2.1.7雏鸭：1～5日龄75只易感健康雏鸭。 2.2操作方法 2.2.1病料处理 在无菌室内超净台上无菌采取数例病鸭的肝脏组织10g，于研钵或平皿中剪碎，用玻璃匀浆器制备 组织匀浆，按1：10(W/V)加人生理盐水。将匀浆液转至离心管中，3000r/min离心10min。弃去上层 脂肪，抽取中间清亮的液体，再经过0.22um的灭菌微孔滤膜过滤，收集滤过的液体，作为病料样品直 接接种；或装人10mL玻璃瓶中，盖上胶塞，置专用的密闭铁盒里，于一20℃保存待检，保存期不超过 1年。 2.2.2试验 选取75只健康维鸭，分为A、B和C三组，每组25只，做如下处理： A组（攻毒保护组）：每只鸭颈背部皮下注射1mLDHV高免血清。24h后，每只鸭皮下注射 0.2mL的待检样品。 B组（攻毒组）：每只鸭颈背部皮下注射0.2mL的待检样品。 C组（对照组）：每只鸭颈背部皮下注射0.2mL的生理盐水。 将上述三组鸭置于相同的管理条件下，隔离饲养，连续观察。 2.3结果判定 当C组没有任何一只雏鸭死亡时，对照试验才成立，可进行如下判定，否则应重检。 阳性（十）：B组特征性死亡1的鸭只总数达30%以上（含30%），而A组死亡的鸭只总数低于10% (含10%)。 可疑（土）：B组特征性死亡的鸭只总数低于30%，而A组的鸭只不死亡。此可疑结果应重检，仍为 可疑时则判为阳性。 1）特征性死亡指死亡的胚胎出现如下任何一种病变：尿囊液变绿、肝脏肿大、肝有出血斑点或有坏死灶。 1