SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3730.72013 食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第7部分：水牛成分检测 实时荧光PCR法 Identification of domestic animal ingredient in food and feed- Part 7 : Detection of buffalo ingredient- Real-time PCR method 标准信息服务平台 2013-11-06发布 2014-06-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3730.7—2013 前 言 SN/T3730《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法》共分为以下8个部分： 第1部分：貂成分检测实时荧光PCR法； 第2部分：狗成分检测实时荧光PCR法； 第3部分：狐狸成分检测实时荧光PCR法； 第4部分：驴成分检测实时荧光PCR法； 第5部分：马成分检测实时荧光PCR法； 第6部分：猫成分检测实时荧光PCR法； 第7部分：水牛成分检测实时荧光PCR法； 第8部分：猪成分检测实时荧光PCR法。 本部分为SN/T3730的第7部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国上海出人境检验检疫局、广西水牛研 究所。 本部分主要起草人：张舒亚、曾庆坤、王赢、袁辰刚、李富威、林波、李想、陈颖、韩建勋。 行业标准信息服务平台 I SN/T 3730.7—2013 食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第7部分：水牛成分检测 实时荧光PCR法 1范围 SN/T3730的本部分规定了食品和饲料中水牛成分的实时荧光PCR检测方法。 本部分适用于食品和饲料中水牛成分的定性检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 实时荧光PCRrealtimePCR 在PCR反应体系中加人荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控整个PCR扩增过程。 3.2 Ct值cycle threshold 准信息服务平台 每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。 缩略语 4 下列缩略语适用于本文件。 PCR：聚合酶链式反应（polymerasechainreaction） DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonuleicacid) dNTP：脱氧核苷酸三磷酸（deoxyribonucleosidetriphosphate) CTAB：十六烷基三甲基漠化铵（cetyltrithylammoniumbromide） Tris：三（羟甲基）氨基甲烷［tris（hydroxymethyl）aminomethane EDTA：乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraaceticacid) Taq：水生栖热菌（Thermusaquaticu） OD：光密度值（opticaldensity） 5方法提要 样品经研磨后，提取DNA，以DNA为模板，采用水牛的特异性检测引物和探针进行实时荧光PCR