SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3746—2013 百合枯萎病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Fusarium oxysporum f.sp.lili 行业标准信息服务平台 2013-11-06发布 2014-06-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3746—2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局、上海市农业科学院、中华人民共和国厦 门出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：戚龙君、宋绍祎、戴富明、曾蓉、杨翠云、王宏毅。 行业标准信息服务平台 SN/T3746—2013 百合枯萎病菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了百合枯萎病菌的检疫鉴定方法。 本标准适用于百合鳞球茎中携带的百合枯萎病菌的检疫鉴定 2病菌基本信息 中文名：百合枯菱病菌 英文名：lilyfusariumwilt 学名:Fusariumorysporumf.sp.liliiSnyd.&hans. 分类地位：无性阶段属于：真菌界（KingdomFungi），半知菌亚门（Deuteromycotina），丝孢纲（Hy phomycetes），瘤座孢目（Tuberculariales），瘤座孢科（Tuberculariaceae），镰刀菌属（Fusarium）。未见 有性阶段。 传播途径：主要有：a）土壤传播，土壤带菌传播是该病原菌传播的主要途径之一；b）种球传病，带 病的种球通过买卖、运输等途径传播病害；c）残体带菌，病球的残体存在大量病原菌，在土壤中能长期 存活，在再次种植过程中，能传播病菌。 百合枯萎病菌的其他信息参见附录A。 3方法原理 业标准信息 本标准根据该病菌在百合鳞茎球上的主要危害症状特征、形态学特征以及PCR反应特性为鉴定百 合枯萎病菌的依据。 4仪器和用具 4.1主要仪器与用具 超净工作台、生化培养箱、生物显微镜、生物体视显微镜、PCR仪、凝胶电泳仪、台式冷冻离心机、水 浴培养箱、制冰机、旋涡振荡器、电泳仪、恒温水浴锅、紫外透射仪、凝胶成像系统、研钵和研棒、天平（感 量0.0001g）、白磁盘和尖头镊子、pH计、塑料袋、离心管等。 4.2主要试剂和培养基 次氯酸钠、Tris-HCl、氯化钠、EDTA、三氯甲烷、异戊醇、4种脱氧核苷三磷酸（dNTPs）、漠溴化乙锭 (EB）、RNase酶、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、异丙醇、巯基乙醇、溴酚蓝、CTAB、Taq酶等。PSA培养基 5病原菌鉴定 5.1症状检查 根据百合枯萎病在百合鳞球茎上的特有症状特点，在光线充足处，对于抽取的样品逐个检查块茎表 1