SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T3506—2013 布氏杆菌病荧光偏振试验操作规程 Procedure of fluorescence polarisation assay for brucellosis 行业标准信息服务平台 2013-03-01发布 2013-09-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3506—2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：王玉玲、栾慎顺、柴铭骏。 行业标准信息服务平台 I SN/T3506—2013 布氏杆菌病荧光偏振试验操作规程 1范围 本标准规定了布氏杆菌病荧光偏振试验技术要求。 本标准适用于布氏杆菌病的检疫、筛查和监控。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 3生物安全措施 为了保护实验室人员的安全，应由经过生物安全培训的工作人员进行布氏杆菌病的检测，应当采取 预防气溶胶感染的安全措施。所有废弃物应按照GB19489中的有关规定处置。 4试验原理 溶液中的分子作随机转动。分子的大小是影响转动速率的主要因素，与其成反比关系。因而小分 子较大分子转动得快。如果给分子标记上荧光色素，通过68.5°角度的转动时间即可通过测量水平和 垂直的偏振光强度来确定。因而，大分子比转动快的小分子发射更多的偏振光。 诊断布氏杆菌病时，布氏杆菌光滑型LPS的小分子量片段OPS（平均22kD），标记上异硫氰荧光 素（FITC），用作抗原。然后加到待检血清中，若有抗体，与标记抗原结合后就会降低其转动速度，用荧 息服务平台 光偏振仪器测定出偏振值，通过偏振值判定样品的阴、阳性。 5试剂和材料 5.1阳性对照：布氏杆菌病荧光偏振商品化试剂。 5.2阴性对照；布氏杆菌病荧光偏振商品化试剂。 5.325×浓缩的反应缓冲液：布氏杆菌病荧光偏振商品化试剂。 5.4结合物：标记有异硫氰荧光素的O型多糖（OPS)抗原，布氏杆菌病荧光偏振商品化试剂。 5.596孔黑色平底微量板。 5.6除另有规定，本方法试验用水应使用符合GB/T6682规定的三级水。 6仪器和设备 6.1荧光偏振仪。 1