SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3497—2013 水产品中颚口线虫检疫技术规范 Quarantine protocolfor Gnathostoma in aquatic products 行业标准信息服务平台 2013-03-01发布 2013-09-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3497—2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、广西大学、广西壮族自治区疾病预防控 制中心，中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：李树清、黄维义、张鸿满、陈韶红、李雯雯、吴慧芳、李健、张永年、张子群、 陈志飞、王巧全、张强、王艳。 行业标准信息服务平台 SN/T3497—2013 水产品中颚口线虫检疫技术规范 1范围 本标准规定了颚口线虫第三期幼虫的形态学鉴定和PCR检测方法。 本标准适用于水产品中颚口线虫的检疫、流行病学调查和监测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T18088出入境动物检疫采样 3概述 颚口线虫病（Gnathostomiasis）是由颚口线虫（Gnathostoma）引起的人兽共患寄生虫病。人主要因 生食或食人未熟的含有颚口线虫第三期幼虫的水产品而导致颚口线虫病。颚口线虫的分类、生活史、分 布参见附录A。 4设备和材料 行业标准信息服务平台 4.1仪器和器材 4. 1. 1 生物显微镜。 4. 1. 2 体视显微镜。 4. 1. 3 PCR扩增仪。 4.1.4 电泳仪 4. 1. 5 凝胶成像系统。 4. 1. 6 网筛（10目）。 4. 2 试剂和溶液 4.2. 1 Taq 酶(5 U/μL)。 4. 2. 2 2. 5 mmol/L dNTP。 4.2.3 25 mmol/L MgClz 。 4.2.4 10XPCR缓冲液（无Mg²+）。 4.2.5 分子量指示物:100 bp~2000 bp DNA marker。 4.2.6 50%和70%乙醇。 4.2.7水，符合GB/T6682中一级水的规定。 见附录B)。 4.3引物 扩增颚口线虫核糖体DNA第二内转录间隔区（ITS2）引物序列为： 1