SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3306.5—2013 国境口岸环介导恒温扩增（LAMP)检测方法 第5部分：布鲁氏菌 Loop-mediated isothermal amplification detection method at frontier port- Part5:Brucellosis 行业标准信息服务平台 2013-03-01发布 2013-09-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3306.5—2013 前言 SN/T3306《国境口岸环介导恒温扩增（LAMP)检测方法》共分为5部分： 第1部分：鼠疫杆菌； 第2部分：产毒素霍乱弧菌； 第3部分：志贺氏菌； 第4部分：嗜肺军团菌； 第5部分：布鲁氏菌。 本部分为SN/T3306的第5部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、中国疾病预防控制中心、广州华峰生物 科技有限公司。 本部分主要起草人：陆晔、田桢干、邱瑾、鞠志英、章琪、李强、方筠、李晓虹、何宇平、李平、卢钟山、 王婷、阙飚、曹以诚、杜正平、陈。 行业标准信息服务平台 I SN/T3306.5—2013 国境口岸环介导恒温扩增（LAMP）检测方法 第5部分：布鲁氏菌 1范围 SN/T3306的本部分规定了国境口岸检测布鲁氏菌病疑似样本、不明物质等样品中布鲁氏菌的环 介导恒温扩增（LAMP）法。 本部分适用于国境口岸布鲁氏菌的筛选检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB16885布鲁氏菌病监测标准 GB19489实验室生物安全通用要求 WS/T230一2002临床诊断中聚合酶链反应（PCR）技术的应用 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 Betaine：甜菜碱 Bst酶：BstDNA聚合酶（大片段）[BstDNApolymerase(largefragment)] DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid） dNTP：脱氧核苷三磷酸（deoxyribonucleosidetriphosphate) EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraaceticacid) LAMP环介导恒温扩增(loop-mediated isothermalamplification TritonX-100：聚乙二醇辛基苯基醚 生物安全措施 为了保护实验室人员的安全，应由通过生物安全培训并具备资质的工作人员检测布鲁氏菌，所有培 养物和废弃物应参照GB19489中的有关规定执行。 5防污染措施 防止污染措施应符合WS/T230一2002的规定。 6技术概要 根据布鲁氏菌的特异性序列基因设计特异性内引物、外引物各一对，在特异性识别靶序列上的独立 1