SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2965—2011 植物病原真菌分子生物学检测规范 Criterion on detection of plant pathogenic fungi by molecular biology 行业标准信息服务平台 2011-05-31发布 2011-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2965—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国珠海出入境检验检疫局、华南农业大学、深圳职业技术学院。 本标准主要起草人：彭仁、曾大兴、习平根、李敏慧、姜子德、张卫东、乐海洋、陈德蓉、冯欣， 行业标准信息服务平台 I SN/T 2965—2011 植物病原真菌分子生物学检测规范 1范围 本标准规定了植物病原真菌分子生物学检测规范 本标准适用于植物及其产品中的植物病原真菌、分离纯化的植物病原真菌的分子生物学检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求 GB/T23632进境植物检疫截获有害生物鉴定复核规程 GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测 SN/T 1127 小麦印度腥黑穗病菌检疫鉴定方法 SN/T 1155 玉米霜霉病菌检疫鉴定方法 SN/T 1193 基因检验实验室技术要求 SN/T 2080 栎树猝死病菌检疫鉴定方法 SN/T 2126 黑麦草腥黑穗病菌检疫鉴定方法 3术语、定义和缩略语 3.1术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1. 1 样品sample 3. 1. 2 聚合酶链式反应polymerase chain reaction;PCR 体外酶促合成特异DNA片段的一种分子生物学实验方法，主要由高温变性、低温退火和适温延伸 三个步骤反复的热循环构成：即模板DNA先经高温变性为单链，在DNA聚合酶和适宜的温度下，两条 引物分别与两条模板DNA链上的一段互补序列发生退火，接着在DNA聚合酶的催化下以四种脱氧核 苷酸三磷酸（dNTPs）为底物，使退火引物得以延伸。如此反复，使位于两段已知序列之间的DNA片段 呈几何倍数扩增。 3.1. 3 巢式聚合酶链式反应 nestedPCR;nPCR 巢式PCR 利用两套PCR引物对（巢式引物）进行两轮PCR扩增反应的一种分子生物学实验技术。在这种技 术中，首先用一对外引物进行第一轮PCR扩增，然后再使用第一对引物扩增的DNA序列内部的一对 内引物再次扩增，所以称为巢式PCR。由于使用了两对引物并且进行了两轮扩增反应，因此实验的敏 1