SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2617—2010 冬生疫霉病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Phytophthora hibernalis Carne 行业标准信息服务平台 2010-05-27发布 2010-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2617—2010 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：吴品珊、杜洪忠、严进。 行业标准信息服务平台 I SN/T 2617—2010 冬生疫霉病菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了植物检疫中冬生疫霉病菌PhytophthorahibernalisCarne的检疫鉴定方法。 本标准适用于针对冬生疫霉病菌寄主的苗木、枝条、枝叶、果实以及夹带土壤中的冬生疫霉病菌检 疫鉴定。 2原理 根据冬生疫霉病菌在寄主上的症状、形态学特征和PCR特异性扩增片段为鉴定依据。该病菌的其 他相关资料参见附录A。 3仪器 3.1生物显微镜，体视显微镜。 3.2光照生物培养箱。 3.3高压灭菌器。 3.4高速离心机。 3.5PCR扩增仪，电泳仪，凝胶成像仪。 行业标准 4i 试剂、材料和培养基 4.1试剂 4.1.1匹马霉素，利福平钠盐，苯菌灵，恶霉灵，碳酸钙（CaCO），β-谷甾醇，色氨酸，硫氨，氯化钙 (CaCl²·H,O），次氯酸钠(NaCIO)。 4.1.2琼脂糖，SDS（十二烷基硫酸钠），Tris-HCI，氯化镁，盐酸，EDTA（乙二胺四乙酸四钠盐），氢氧 化钠，乙酸钠，氯化钠，Tris，CTAB（十六烷基三甲基溴化铵），TAE，无水乙醇，苯酚，三氯甲烷，异丙醇， 异戊醇，SYBRGreenI核酸染料。 4.1.3蛋白酶K,Taq DNA polymerase,dNTP,DNA分子量Marker。 4.1.4PCR引物PHIB1/PHIB2。 4.2材料 琼脂，V8液，雪松（Cedrusdeodara）松针，柑橘（Citrusspp.）叶片，胡萝卜，玉米油。 4.3培养基 本标准所用的培养基参见附录B。 1