SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2615—2010 苹果边腐病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Phialophora malorum (Kidd & Beaumont) McColloch 行业标准信息服务平台 2010-05-27发布 2010-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2615—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院，中华人民共和国新疆出入境检验检疫局，中华人民共 和国浙江出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：吴品珊、杜洪忠、王文正、吴志毅、严进。 行业标准信息服务平台 I SN/T2615—2010 苹果边腐病菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了植物检疫中苹果边腐病菌的检疫鉴定方法。 本标准适用于进出境苹果和梨果实中苹果边腐病菌的检疫和鉴定。 2原理 苹果边腐病菌在寄主上的症状、形态学特征及分子生物学特性是制定本标准的主要依据。 3仪器和用具 3.1仪器 生物显微镜（具测量功能），体视显微镜，超净工作台光照生物培养箱，天平，高压灭菌器，台式高速 离心机，pH计，水浴箱，PCR扩增仪，电泳仪，凝胶成像仪。 3.2用具 烧杯，三角瓶，量筒，试管，培养皿（直径9cm），载玻片，盖玻片，酒精灯，塑料研杆，移液器，移液器 行业标准 吸头，离心管，液氮罐。 4试剂和培养基 4.1试剂 琼脂粉，马铃薯，葡萄糖，乳酸，琼脂糖，无菌双蒸水，液氮，Tris-HCl，氧化镁，盐酸，EDTA，氢氧化 钠，乙酸钠，氯化钾，Tris，CTAB，TAE，无水乙醇，苯酚，溴化乙锭（LB），三氯甲烷，异丙醇，异戊醇，蛋白 酶K，TaqDNA聚合酶，dNTP,DNA分子量Marker,PCR特异性引物PMA-1和PMA-2，实时荧光 PCR特异性引物PMA-P1、PMA-P2及探针PMA-Probe-457。 4.2培养基 马铃薯葡萄糖培养基（PDA）：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，1000mL蒸馏水，灭菌。 微酸性马铃薯葡萄糖培养基（APDA）：制备1000mLPDA，灭菌后冷却到50℃，加人1.5mL85% 的乳酸。 5鉴定方法 5.1症状检查 病害症状参见附录A。