SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2497.182010 进出口危险化学品安全试验方法 第18部分：DNA加合物的检测方法 Test method of import and export dangerous chemicals- Part 18:Detection method of DNA adduct 行业标准信息服务平台 2010-03-02发布 2010-09-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2497.18—2010 前言 第1部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成（UDS)试验； 第2部分：空斑形成细胞（PFC)试验； 第3部分：大型泽繁殖试验； 第4部分：酿酒酵母有丝分裂重组试验； 第5部分：睾丸细胞UDS试验； 第6部分：哺乳类动物细胞姐妹染色单体互换体外试验； 第7部分：小鼠耳肿胀试验； 第8部分：窝淋巴结试验； 第9部分：血清溶血素测定试验； 第10部分：T淋巴细胞增殖功能测定试验； 第11部分：种系突变试验； 第12部分：单细胞凝胶电泳分析试验； 第13部分：荧光原位杂交试验； 第14部分：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳试验； 第15部分：PCR-SSCP实验； 第16部分：Western-Blot实验； 第17部分：哺乳动物行为毒理学试验； 第18部分：DNA加合物的检测方法； 第19部分：NorthernBlot实验； 第20部分：Bradford法测定蛋白质含量； 第21部分：琼脂糖凝胶电泳试验； 第22部分：DNA的Tm值测定方法； 第23部分：细胞器的分离实验方法； 第24部分：细胞免疫功能体外检测方法； 隹信息服务平 第25部分：体液免疫功能试验， 第26部分：巨噬细胞功能试验； 第27部分：流式细胞术检测调亡； 第28部分：穿梭质粒在突变检验中的应用； 第29部分：生化需氧量（BOD）测定。 本部分为SN/T2497系列标准的第18部分。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分负责起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局，中华人民共和国湖南出入境检验检 疫局。 本部分主要起草人：于艳军、王利兵、赵好力宝、赵黎华、韩伟、熊中强， 本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 1 SN/T 2497.18—2010 进出口危险化学品安全试验方法 第18部分：DNA加合物的检测方法 1范围 SN/T2497的本部分规定了进出口危险化学品DNA加合物检测方法的主要试剂和材料、主要仪 器设备、试验步骤和试验结果。 本部分适用于32P后标记法检测进出口危险化学品引起的DNA加合物。 2术语、定义和缩略语 2.1术语和定义 下列术语和定义适用于本部分。 2. 1. 1 DNA加合物DNAadduct DNA加合物就是亲电性的化合物或其代谢产物与DNA形成共价相联的化合物，是DNA化学损 伤的主要形式之一。 2.2缩略语 下列缩略语适用于本部分。 2.2.1 DNA月 脱氧核糖核酸 3原理 含有加合物的DNA链在核酸内、外切酶的作用下降解为3'单磷酸核苷，用核酸酶（P1或S1)处理 3'单磷酸核苷，正常的3'单磷酸核苷被去磷酸化，而具有加合物的3'单磷酸核苷可以抵抗这一作用。在 形成3'-5'二磷酸核苷，通过检测3P-ATP的量对DNA损伤产生的加合物进行定量。 4主要试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，实验用水为灭菌蒸馏水或超纯水。 信息服务 4.1内切酶。 4.2外切酶。 4.3P1核酸酶。 4.432P-ATP。 4.5T4多核苷酸激酶。 4.6T,多核苷酸激酶缓冲液：0.1mol/LBicine-NaOH,0.1mol/LMgClz,0.1mol/L二硫化苏糖醇， 10mmol/L精胀，pH值9.5。 4.7ODS-TLC板（反相吸附薄层色谱板）。 4.8PEI-TLC板（阴离子交换薄层色谱板）。 5主要仪器设备 5.1紫外分光光度计。