SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2332—2009 国境口岸霍乱弧菌的荧光PCR检测方法 Detection of Vibrio cholerae with real-time PCR at frontier ports 行业标准信息服务平台 2009-07-07发布 2010-01-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2332—2009 前言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中华人民共和国珠海出人境检验检 疫局。 本标准主要起草人：朱海、莫秋华、朱玉兰、范放、杨泽、赵芳、黄李华、郑晓燕。 本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T 2332—2009 国境口岸霍乱弧菌的荧光PCR检测方法 1范围 本标准规定了国境口岸霍乱弧菌荧光PCR检验的对象、检测程序及结果报告。 本标准适用于01群霍乱弧菌菌株和0139群霍乱弧菌菌株的筛选检测 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB15984霍乱诊断标准及处理原则 GB19489实验室生物安全通用要求 SN/T1022出口食品中霍乱检测方法 SN/T 1239 国境口岸霍乱检验规程 WS/T230 临床诊断中聚合酶链反应(PCR)技术的应用 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1 荧光 PCRfluorescence polymerase chain reaction 又称为实时PCR（real-timePCR），是在普通PCR的基础上利用荧光染料在激发光作用下所释放 的荧光光能的变化来直接反映PCR扩增产物量变化的新技术。 3. 2 Ct 值cycle threshold 即循环阈值，指每个反应管内所检测到的荧光信号刚好达到设定的阈值时所经历的循环数。 3.3 分子信标探针molecularbeaconsprobe 分子信标探针在空间结构上呈茎环状结构，其中环序列是与靶核酸互补的探针；茎序列由与靶序列 无关的互补序列构成，茎的一端连上一个荧光分子，另一端连上一个淬灭分子。当无靶序列存在时，荧 光信标呈茎环结构，茎部的荧光分子与淬灭分子非常接近，荧光分子发出的荧光被淬灭分子吸收并以热 能的形式散发，此时检测不到荧光信号；当有靶序列存在时荧光信标探针的环序列与靶序列特异性结 合，形成的双链体比分子信标的茎环结构更稳定，荧光分子与萍灭分子分开，此时荧光分子发出的荧光 不能被淬灭分子吸收，可以检测到荧光。因此实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步，从而 可以实时监测PCR扩增的情况。 4缩略语 下列缩略语适用于本标准。 4.1 VC Vibrio Cholerae 霍乱弧菌。