SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2242—2008 自然杀伤细胞活性试验 Natural killer cell activity assay 行业标准信息服务平台 2008-11-18发布 2009-06-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2242—2008 前言 本标准由国家质量监督检验检疫总局提出。 本标准由中国国家认证认可监督管理委员会归口。 本标准负责起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。 本标准参加起草单位：中化化工标准化研究所、江南大学和天津市检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：吕刚、张园、赵黎华、冯智勐、于智睿、赵琢。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T 2242—2008 自然杀伤细胞活性试验 1范围 本规范规定了自然杀伤细胞活性试验的测定方法、试验数据和评价。 本规范适用于检测实验动物一次或多次接触化学物质后，对NK细胞活性的影响。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB14924.1实验动物配合饲料通用质量标准 GB14925实验动物环境及设施 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1 自然杀伤细胞 natural killer cell,NK 在无抗原刺激下能够杀伤多种有核细胞的淋巴细胞，NK细胞是一种能表达“天然细胞毒作用”的 独特细胞，NK细胞存在于血液和淋巴组织中，也存在于无胸腺个体的血液和淋巴组织中，它是抗自发 性肿瘤细胞和病毒感染细胞的第一道防线，在免疫监视中起重要作用。 4测定方法 4.1乳酸脱氢酶（LDH)测定法 4.1.1材料及仪器 靶细胞K562或YAC-1、Hanks液、RPMI1640培养液、青霉素、链霉素、谷胺酰胺、二巯基乙醇、乳 酸锂或L乳酸钠、硝基氯化四氮唑（INT）、嗪二甲酯硫酸盐（PMS）、氧化辅酶I（NAD）、0.2mol/L Tris-HCI缓冲液、可调微量加样器、96孔平底板、CO，培养箱、酶标仪、LDH基质液的配置见表1。 表1LDH基质液的配制 试 剂 浓度/(mol/L) 乳酸锂 5×10- 硝基氯化四氮唑 6. 6×10-4 吩嗪二加酯硫酸盐 2.8 ×10- 氧化型辅酶 1.3×10-3 将上述试剂溶于0.2mol/L的Tris-HCl缓冲液（pH8.2） 4.1.2操作方法 4.1.2.1动物选择 选择健康6周龄～8周龄，雌性CBA、C3H或BALB/C小鼠，试验前应在动物室适应7d。试验动 物的饲养和环境设施应符合GB14924.1和GB14925。