SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1961.15—2013 出口食品过敏原成分检测 第15部分： 实时荧光PCR方法检测芹菜成分 Detection of allergen components in food for export- Part 15: Real time PCR method for detecting celery components 行业标准信息服务平台 2013-03-01发布 2013-09-16实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1961.15—2013 前言 SN/T1961《出口食品过敏原成分检测》共分为19部分： 第1部分：酶联免疫法检测花生成分； 第2部分：实时荧光PCR法检测花生成分； 第3部分：酶联免疫吸附法检测养麦蛋白成分； 第4部分：实时荧光PCR方法检测腰果成分； 第5部分：实时荧光PCR方法检测开心果成分； 第6部分：实时荧光PCR方法检测胡桃成分； 第7部分：实时荧光PCR方法检测胡萝卜成分； 第8部分：实时荧光PCR方法检测榛果成分； 第9部分：实时荧光PCR方法检测杏仁成分； 第10部分：实时荧光PCR方法检测虾/蟹成分； 第11部分：实时荧光PCR方法检测麸质成分； 第12部分：实时荧光PCR方法检测芝麻成分； 第13部分：实时荧光PCR方法检测小麦成分； 第14部分：实时荧光PCR方法检测鱼成分； 第15部分：实时荧光PCR方法检测芹菜成分； 第16部分：实时荧光PCR方法检测芥末成分； 第17部分：实时荧光PCR方法检测羽扇豆成分； 第18部分：实时荧光PCR方法检测养麦成分； 第19部分：实时荧光PCR方法检测大豆成分。 本部分为SN/T1961的第15部分。 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归门。 本部分起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、深圳大学。 本部分主要起草人：陈颖、曹际娟、郑秋月、吴亚君、徐君怡、刘晓宇、吴海强、袁飞、徐宝梁。 服务平台 SN/T 1961.15—2013 出口食品过敏原成分检测第15部分： 买时荧光PCR方法检测芹菜成分 1范围 SN/T1961.15的本部分规定了食品致敏原芹菜成分的实时荧光PCR检测方法。 本部分适用于食品及其原料中致敏原芹菜成分的定性检测。 本部分在测定芹菜原料产品时参考的测定检测限（LOD）为1mg/kg，在测定植物源性食品时参考 的测定检测限(LOD)为10mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 Ct 值cycle threshold 每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数 3. 2 致敏原芹菜成分allergencelerycompound 致敏原又称过敏原或变态反应原，是指能够使人发生过敏的抗原。芹菜是光敏性蔬菜，过量食用 后，体内的光敏性物质达到一定浓度时，经过阳光照射，就容易导致光敏性物质代谢障碍，诱发皮炎。本 服务。 标准中致敏原芹菜成分即指芹菜特异性DNA片段。 4方法提要 样品经研磨后，提取DNA，以DNA为模板，采用芹菜的管家基因（Mtd）特异性检测引物和探针进 行实时荧光PCR扩增，观察实时荧光PCR的增幅现象，判断样品中是否存在过敏原芹菜成分。 5试剂与材料 除另有规定外，试剂为分析纯或生化试剂，实验用水符合GB/T6682的要求。 5.1CTAB缓冲液:55mmol/LCTAB,1400mmol/LNaCl,20mmol/LEDTA,100mmol/LTris, 用10%盐酸调pH至8.0，121℃，高压灭菌20min，备用。 5.2TE缓冲液(Tris-Cl、EDTA缓冲液):10mmol/LTris-HCl(pH8.0),1mmol/LEDTA(pH8.0)。