SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1941.3—2007 进出口食品中乳酸菌检验方法 第3部分：乳酸杆菌的PCR法 Detection of lactic acid bacteria in food for import and export- Part 3:Lactobacillus PCR method 行业标准信息服务平台 2008-03-01实施 2007-08-06发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1941.3—2007 前言 SN/T1941《进出口食品中乳酸菌检验方法》分为三个部分： 第1部分：分离与计数方法； 一第2部分：PetrifilmTM测试片法； 第3部分：乳酸杆菌的PCR法。 本部分为SN/T1941的第3部分。 本部分的附录A和附录B均为规范性附录。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 本部分起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。 本部分主要起草人：吴斌、郑秋月、李叶、胡传伟、李振荣。 本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 SN/T 1941.3—2007 进出口食品中乳酸菌检验方法 第3部分：乳酸杆菌的PCR法 1范围 SN/T1941的本部分规定了乳酸杆菌的PCR检验方法， 本部分适用于天然或添加乳酸菌的食品及原料中乳酸菌的测定 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过SN/T1941的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB19489实验室生物安全通用要求 SN/T1941.1进出口食品中乳酸菌检验方法第1部分：分离与计数方法 WS/T230—2002临床诊断中聚合酶反应技术的应用 3生物安全措施 为了保护实验室人员的安全，应由具备资格的工作人员检测乳酸杆菌，所有培养物和废弃物应小心 处置。并按照GB19489中的有关规定进行。 4防污染措施 参照WS/T230一2002中第6章进行污染的预防和控制。 5术语、定义和缩略语 5.1术语和定义 下列术语和定义适用于SN/T1941的本部分。 5. 1. 1 V 乳酸杆菌属 Lactobacillus 乳酸杆菌为一类革兰氏阳性无芽孢的细长杆菌，能分解葡萄糖或乳糖产生污染的乳酸，专性厌氧、 兼性厌氧或厌氧，多数无动力，过氧化氢酶阴性。 5. 1.2 聚合酶链反应polymerasechainreaction，PCR 用两段（通常长度为15个～25个核苷酸）寡脱氧核苷酸作为反应的引物，与待测模板DNA链上的 特定位点分别发生互补。在适宜反应液中DNA聚合酶的催化下，通过DNA变性、退火及延伸数十个 循环而获得两个互补位点之间DNA片段的大量拷贝。反应液包括含有镁离子的反应缓冲液、4种脱氧 核苷三磷酸（dNTP）、模板DNA、引物及热稳定DNA聚合酶组成， 5. 1. 3 引物primer 应用化学方法合成一对与已知待扩增基因片段两侧DNA序列互补的寡核苷酸，作为PCR扩增的